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激光共聚焦成像细胞定量分析系统----CQ1为细胞分析及计数测量提供了一种新方法!
多年来,从共聚焦显微镜里获得的3D图像,在细胞生物学研究领域一直处于领先地位。如今,这项成像技术跟群体分析结合在一起,给细胞计数和成像带来了完美的解决方案。
成像-----------------------分析--------------------------计算
CQ1作为一款多功能共聚焦显微观察系统,具有操作简单、价格适中、配置灵活、可被整合到全自动细胞筛选系统中等众多优点:
1、能测球体细胞、群落细胞以及组织切片
★ 不像流式细胞仪需要对细胞进行鞘液分离,CQ1可直接测量未前处理的培养皿细胞
★ 共聚焦磁盘拥有共聚焦性能,可快速、柔和的获取3D图像
★ 最大10个发射光,4个激发光以及透射明场成像
★ 活细胞室以及延时计数
★ 丰富的特点描述,有利于对复杂细胞的分析
★ 宽观察视野和分割成像满足大样品成像
2、兼具流式细胞仪具有的性能
● 图像获聚与数据分析实时显示
● 内置应用模板,可直接使用
● 每个数据均可回溯原始图像,并支持重新处理
● 简单的多合一操作系统
3、开放性平台
▲ 可作为图像获得和计数仪模块,集成到完整的细胞分析系统中
▲ 可使用第三方数据分析软件,可输出FCS/CSV/ICE格式数据
▲ 兼容多种细胞培养板、样品管
4、紧凑、轻量的台式主机,无需暗室
整合多种功能的紧凑机箱
1、 共聚焦成像单元:在最小损伤样品的提前下,通过增强型微距双Nipkow共聚焦盘进行多光线扫描,实现高通量2D/3D图像。
2、 显微镜单元:高性能物镜(高级复消色差物镜)以及宽视野、高分辨率科研级sCMOS相机可对亚微米级样品进行成像、测量。
3、发射滤光片:最多可安装10张发射光滤光片,在一个试验中,可对多个标记物进行测量。
4、荧光图像:可安装多达4个共聚焦荧光激光光源,实验一个试验中获得多色荧光结果。
5、明场图像(可选):透射光获取相位差及明场视野(持续改进中),有利于细胞定形。
6、环境保持:样品台内含加热和气体混合控制装置,具有温度、湿度、CO2/O2控制功能;在保持细胞活力的同时测量其活性。
7、支持多种样品容器
8、系统集成
CQ1:最容易的3D测量
应用
质控:细胞培养的分化
质量控制切片图片--细胞识别--未分化、部分分化
--阳性、阴性数据统计
团聚细胞图像以不同切片及3D形式呈现。通过图像分析,得到标记物表达水平、单个细胞的空间信息。
质控:人类IPSC球体
球状结构及多表达水平能够有效评估人类IPSC球状体的多能性。
更深层的分析
高分辨率、定量,CQ1提供的高质量共聚焦成像图片能够实验多种类型的图像分析。形状学变化、微粒分析及其他需要高分辨率图像的HCA分析。当然也可以作为共聚焦显微镜以获取图像和数据。
应用
分析:gamma-H2AX病变形成
H2AX Ser139 (gamma-H2AX)组蛋白磷酸化是双链DNA断裂的重要标志,利用高速共聚焦成像结合微粒分析模型即可简单地定量分析gamma-H2AX病变的形成。
核转移
NFkB是DNA重要的转录因子,在调节免疫反应、炎症中起重要作用,被视为癌症治疗和抗炎症药的靶点。结合抑制蛋白IkB的NFkB位于细胞质中,一旦刺激因子通过细胞膜受体这条信号通路打开,IkB就会从NFkB上分离,从而激活NFkB,NFkB进入细胞核中结合特定的DNA序列,最终引起炎症。
细胞核和细胞质内NFrB表达水平即可指示细胞质和细胞核相关蛋白含量。
时间延迟成像!新!
适宜的细胞培养环境,低光毒性和光漂白延时成像能够研究细胞的真实生长情况。
时间延时分析:细胞凋亡
96孔板分布10000个/孔HeLa细胞用Hoechst33342(1ug/ml,30min,37℃)染色,用0-10μM的星孢菌素处理,每15分钟获取一次图像。能够识别出星孢菌素处理的核区DNA的分离。
在10uM星孢菌素处理组中识别核区域的DNA分裂。
延迟分析可以监测克隆体和单个细胞大小及克隆形成过程。光低毒性的CQ1能够采集优异的延迟图像。
时间延迟分析:ESC(食管鳞癌)克隆
多次测量
无需处理成悬浮单细胞,在细胞培养板中即可成像,因此可以使用同一样品做不同测量。数据和图像无缝对接,有利于发现细微差别。
循环肿瘤细胞(CTC)
CTC细胞是循环在外周血中的肿瘤细胞,通过血管和淋巴管扩散早期肿瘤细胞。因此,当扩散发生时血管中含有CTC细胞。CTC细胞的监测使诊断早期肿瘤发生和扩散成为可能。CTC细胞的数量是很少的,在10ml的病人血液中,1×106个血细胞中CTC细胞不到100个。因此,流式细胞仪只会把它们当作杂质,并不能检测到,然而,成像仪可轻易的发现它们。
细胞周期分析:有丝分裂期的抑制剂
H3组蛋白的第10个丝氨酸的磷酸化是细胞从G2末期到有丝分裂过程的重要特征。利用CQ1的多色通道功能来分析与H3Ser10P免疫荧光有关的细胞周期。