荧光定量PCR

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更新: 2021-06-01
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提供商: 上海丰恒
服务名称: 荧光定量PCR
规格: 具体报价根据实验设计和样本量

技术简介:

实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝对定量,而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合,荧光定量PCR在医学检测及其他各个领域中的应用前景十分广阔。

技术原理:

荧光定量PCR所使用的荧光基团可分为两种:荧光探针和荧光染料。使用SYBR荧光染料法来进行荧光定量PCR时,我们首先在PCR反应体系中加入过量SYBR荧光染料。SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后发射一定量的荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

Taqman探针则是利用探针与模板的特异性结合的特点,以及探针内荧光报告基团和淬灭基团的分子特性来实现对PCR进行定量检测。这种方法可以实现高灵敏度,严格针对特定碱基序列的定量实验。