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份 库存999份
| 货号： | C4-0431-16-01 |
| 保修期： | 5年 |
| 现货状态： | 有库存 |
| 供应商： | 西安蓝晓科技新材料股份有有限公司 |
| 数量： | 1000 |
| 规格： | 1*1ml |
1. 产品介绍：
苯甲醚高流速琼脂糖层析预装柱是预先将苯甲醚高流速琼脂糖层析介质装进空柱，客户购买后可直接连接注射器或层析系统使用，无需自行拆装，节省时间，提高工作效率。同时工厂装填保证了柱效和重复性，进而保证了实验结果的可靠度。预装柱由空柱管、上下筛板、塞头分布器、上下堵头、柱帽及层析填料组成，空柱管采用生物兼容PP材质，无毒性，具有生物学惰性，筛板为PE材质,层析介质为偶联了苯甲脒配基的琼脂糖凝胶过滤层析介质，天然亲水。苯甲脒琼脂糖层析预装柱活化方法独特，流速高，非特异吸附少，填料粒度均匀，分离效果佳。
2.规格 ：1ml（预装柱）、5ml（预装柱）
3.性能介绍
| 预装柱性能 | 产品名称 | 苯甲醚高流速琼脂糖层析预装柱 | |
| 规格 | 1ml | 5ml | |
| 柱床体积 | 1ml | 5ml | |
| 柱床尺寸 | 0.7×2.5cm | 1.6×2.5cm | |
| 推荐流速 | 1ml/min | 5ml/min | |
| 最大流速 | 4ml/min | 20ml/min | |
| 筛板孔径 | 10μm | ||
| 耐压 | 0.3MPa | ||
| pH适用范围 | 3～10（长时间）；2～11（在位清洗） | ||
| 保存温度 | 2～8℃ | ||
| 保存液体 | 20%乙醇/乙酸缓冲液(乙酸缓冲液PH=4) | ||
| 层析填料性能 | 基质 | seplife4FF | |
| 配基 | 对氨基苯甲脒 | ||
| 形状 | 球形 | ||
| 粒径（μm） | 50～160 | ||
| 配基密度 | 12μmol/ml | ||
| 吸附载量 | >35mg胰蛋白酶/ml介质 | ||
- 使用方法
4.1平衡
平衡缓冲液可采用：0.05mol/LTris-HCl,0.5mol/L NaCl pH7.4缓冲液，用2～5个柱体积的初始缓冲溶液进行平衡，建议流速为100 cm/h。观察检测器的变化，直到电导率、pH值等参数不变。
4.2上样
样品的预处理：样品需用0.45μm滤膜过滤，在上样，以免堵塞层析柱。上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择，也可通过线性实验找到最佳上样量。
4.3淋洗
用2～3个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗，观察检测器的变化，直到电导率、pH值等参数基本不变。
4.4洗脱
洗脱方式一般有3种：
4.4.1竞争洗脱：在缓冲液中加入20mol/L的p-氨基苯甲醚。
4.4.2 pH洗脱：如0.05mol/L甘氨酸-HCl，PH3.0或者0.01mol/L HCl 0.05mol/LNaCl,PH2.0。
4.4.3变性洗脱：如在洗脱缓冲液中加入8M尿素、或6M盐酸胍等。
5.再生、清洗、保存
5.1预装柱再生
用纯水洗5个柱床体积，然后分别用0.1mol/L Tris-HCl 0.5mol/L NaCl pH8.0 缓冲液和 0.1mol/L醋酸 0.5mol/L NaCl pH4.0的缓冲液交替洗涤3～5个柱体积3次，再用水洗3个柱床体积，然后再用20%的乙醇淋洗3个柱床体积，柱子置于+4～8℃环境中。如果在色谱操作过程中用到了变性剂或者去污剂，也可以用上述方法洗柱子。
5.2在位清洗
在应用中，柱子上结合的一些物质如变性蛋白和脂质等不能通过再生过程去除，这种情况下，可以用去污剂如0.1%Triton X-100在37℃洗柱子1min。之后立即用平衡液洗5个床柱体积即可。
6.注意事项
l 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。
l 本产品保存条件为20%乙醇/乙酸缓冲液(乙酸缓冲液PH=4)，储存温度2～8℃，不能使柱子冷冻。
l 2-8℃,常压,避光运输。
l 仅供科研实验使用。
7预装柱常见问题解答
| 出现的问题 | 可能原因 | 解决办法 |
| 流出柱子的液体减少或消失 | 柱子出口关闭或泵不工作 脂蛋白或蛋白聚集物沉淀了 样品过于黏稠 滤膜、接口或管道堵塞 柱子中微生物生长 | 打开出口，检查泵有没有泄露迹象 使用前过滤样品及缓冲液，阻止脂蛋白，避免蛋白聚集 用缓冲液适当对样品进行稀释 检查各环节，如有堵塞进行清除，或更换柱子 分离柱不用时将其保存于20%乙醇溶液中，对其进行在位清洗 |
| 目的蛋白峰不能同其他峰分开 | 样品加载不正确 错误的pH或离子强度的缓冲液 洗脱条件不是最佳 柱子过载 柱子装填柱效差 分离过程由于稳定剂的去除而导致蛋白在柱子中沉淀 | 检查柱床表面及滤膜是否被污染 检查缓冲液的pH及离子强度，保证前一个运行后对柱子进行了再平衡，检查运行条件是否和要求 改变洗脱条件。改用更平缓的梯度，降低流速 减少样品加载量 检查柱效，如有必要更换柱子 调整洗脱液以维持蛋白稳定性。 |
| 蛋白不结合或不按预期洗脱下来 | 蛋白质或脂沉淀在柱子滤膜或柱子里了。 在储存过程中样品发生了改变 蛋白在洗脱液中不稳定或失活 错误的pH或离子强度的缓冲液 蛋白产生集聚并同填料紧密结合 分离柱平衡不完全 | 清洗柱子，检查缓冲液的PH及离子强度。 制备新鲜样品。 确定蛋白质稳定的pH及离子强度 检查缓冲液的pH及离子强度，重新准备缓冲液 进行在位清洗 重复或延长平衡步骤直到pH及电导达平衡水平。 |
| 色谱图峰较小 | 样品在选定波长吸收差 | 适当检查检测器的吸收范围，如满足要求，使用另一波长检测 |
| 运行中压力升高 | 柱床被压缩 样品浑浊 蛋白产生沉淀 | 重新装柱或使用新柱 增加样品溶解性，使用前进行膜过滤 提前除去脂蛋白 |
| 柱床有气泡 | 缓冲液或样品未进行脱气 环境温度发生改变 | 彻底脱气 缓冲液若在冰箱保存使用前需是温度达到恒定室温 柱子避免加热升温 |
| 柱床有裂缝 | 大体积气体渗漏柱中 | 检查连接点是否有泄露，或更换柱子 |
8.订货信息
| 产品名称 | 货号 | 包装规格 | 价格/元 |
| 苯甲醚高流速琼脂糖层析预装柱 | C4-0431-16-01 | 1×1ml | 600 |
| C4-0431-16-05 | 8×1ml | 4200 | |
| C4-0431-01-01 | 1×5ml | 2700 | |
| C4-0431-01-03 | 5×5ml | 10000 |
蓝晓科技生命科学部：生物层析纯化介质（琼脂糖、葡聚糖、树脂基）、层析预装柱；纯化介质的选择、定制与使用指导；纯化工艺的开发、优化与定制服务。
联系方式：18192726252 029-81104050
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