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| 提供商： | ABI |
| 服务名称： | mRNA miRNA lncRNA circRNA PCR |
荧光定量PCR检测
1. 设计并合成Realtime PCR引物。
2. 引物溶解后使用Promega的TaqDNA聚合酶进行含SG（SYBR® Green）的PCR反应的优化。
3. 客户样品RNA抽提
4. RNA质量检测
a． 紫外吸收测定法测定RNA在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，以计算其浓度并评估RNA纯度。
b． 使用甲醛电泳试剂（ambion）进行变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA纯度及完整性。
5. 按照逆转录酶（Invitrogen或Promega）使用说明将样品RNA逆转录为cDNA。
6. 制备标准曲线样品：进行相对定量，需要先将样品的目的基因以及管家基因进行PCR扩增，其产物进行梯度稀释用于做标准曲线。
7. 标准曲线样品和待测样品分别加入到含SG的RealTime PCR反应液中（其中TaqBeadTM 热启动聚合酶来自Promega公司），进行RealTime PCR扩增和检测。
8. 检测结果进行标准曲线分析，以对待测样品的目的基因进行定量。相对定量实验需要进一步用样品的目的基因测得值除以管家基因测得值以校正误差，所得结果代表某样品的目的基因相对含量。
9. 提供实验报告，包括详细的实验方法及实时荧光定量PCR实验结果及相关图表。
实时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差，提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化、比较不同组织的mRNA表达差异、验证基因芯片和siRNA干扰的实验结果。
英拜为您提供的实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成；主要实验步骤如下：
英拜为您提供的实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成；主要实验步骤如下：
1. 设计并合成Realtime PCR引物。
2. 引物溶解后使用Promega的TaqDNA聚合酶进行含SG（SYBR® Green）的PCR反应的优化。
3. 客户样品RNA抽提
4. RNA质量检测
a． 紫外吸收测定法测定RNA在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，以计算其浓度并评估RNA纯度。
b． 使用甲醛电泳试剂（ambion）进行变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA纯度及完整性。
5. 按照逆转录酶（Invitrogen或Promega）使用说明将样品RNA逆转录为cDNA。
6. 制备标准曲线样品：进行相对定量，需要先将样品的目的基因以及管家基因进行PCR扩增，其产物进行梯度稀释用于做标准曲线。
7. 标准曲线样品和待测样品分别加入到含SG的RealTime PCR反应液中（其中TaqBeadTM 热启动聚合酶来自Promega公司），进行RealTime PCR扩增和检测。
8. 检测结果进行标准曲线分析，以对待测样品的目的基因进行定量。相对定量实验需要进一步用样品的目的基因测得值除以管家基因测得值以校正误差，所得结果代表某样品的目的基因相对含量。
9. 提供实验报告，包括详细的实验方法及实时荧光定量PCR实验结果及相关图表。
上海英拜生物科技有限公司
QQ: 1006017746
电话: 021-6170150018019265738
免费热线：400-696-6643传真：021-61266173
官网：www.yingbio.com
丁香通商店：www.yingbio.biomart.cn
地址：上海市徐汇区桂菁路69号24号楼6F
专业提供分子生物学技术服务:
高通量测序：人全基因组重测序、外显子测序、宏基因组测序、RNA-seq、miRNA-seq、lncRNA-seq、单细胞测序、CHIP-seq；
DNA水平：SNP检测、甲基化检测、CHIP；
RNA水平：、功能分类 PCR芯片、表达谱基因芯片、实时荧光定量PCR、原位杂交；
蛋白水平：WB、抗体芯片、免疫组化、免疫荧光；报告基因实验
细胞实验：细胞培养及转染、干扰及过表达、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、细胞迁移、细胞侵袭；
生物信息学：芯片数据分析、高通量测序分析、 个化分析方案；
SCI协同服务：限量实验整体外包服务（IF1-10）,SCI评估、润色、翻译、调整等服务。
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DNA水平：SNP检测、甲基化检测、CHIP；
RNA水平：、功能分类 PCR芯片、表达谱基因芯片、实时荧光定量PCR、原位杂交；
蛋白水平：WB、抗体芯片、免疫组化、免疫荧光；报告基因实验
细胞实验：细胞培养及转染、干扰及过表达、细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、细胞迁移、细胞侵袭；
生物信息学：芯片数据分析、高通量测序分析、 个化分析方案；
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