RT-PCR

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更新: 2021-05-20
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提供商: 上海钰森生物技术有限公司
服务名称: RT-PCR
规格: 基因/样
 逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription PCR,RT-PCR),是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,利用变性,退火和延伸多步
骤、多循环来扩增目的DNA片段。在该反应过程中,目的DNA产量呈指数增长,使一些极为微量RNA样品检测成为可能。
  实验步骤:
     1. 样品获取、处理和制备
 1.1 悬浮细胞:将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞。PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管
 中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。
 1.2 贴壁细胞:用胰酶消化细胞1×106个/mL,离心PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,
 然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。
 1.3 组织:采集新鲜组织100mg,放入离心管中,做好标记,于液氮冷冻片刻后,置于-80度冰箱保存。
 1.4 血液:用抗凝管收集的全血1mL,加入RNA保护剂,做好标记,置于-80度冰箱保存。
    2. RNA或DNA质控
    3. 反转录
    4. PCR扩增
    5. 琼脂糖凝胶电泳
  我们提供:
  1. 抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本
  2. 操作步骤及详细的试剂和耗材
  3. 引物序列
  4. 琼脂糖电泳图
  5. 原始数据及处理后的正式实验数据
  结果示意图:

  服务周期: 

 
服务内容 说明 价格 实验周期
RT-PCR 提供目的基因片段 100元/基因/样 7个工作日
 
 
  温馨提醒:
 
      1.  细胞样本106以上,收集后-80度保存;组织标本100mg标本;血清或血液1mL以上,干冰运输
      2.  单基因10个样本以上
      3.  试验周期不包括探针、标准品合成时间
      4.  公司默认的抽提方式TRIZOL,如果需要试剂盒抽提,则需要客户提供
      5.  标本公司免费保存一个月,一个月以后自行处理,如果需要邮寄,则需要客户付邮寄费用