提供商: | 晶莱生物 |
服务名称: | 网状纤维染色银染实验服务 |
规格: | 样本 |
实验技术原理:氨银液被组织吸咐与组织中的蛋白结合,经甲醛还原成黑色的金属银沉积于组织内及表面。用氯化金调色后,再用硫代硫酸钠液洗去未还原的银盐,从而将组织内的网状纤维清晰地显示出来。
实验操作流程:
1、切片脱蜡至水,蒸馏水洗,
2、用0.5%高锰酸钾氧化5min,
3、自来水洗,继用蒸馏水洗,
4、用2%草酸漂白切片2min,
5、自来水洗,蒸馏水洗,
6、2%硫酸铁铵媒染5min,
7、水洗,蒸馏水洗,
8、滴入氨性银溶液浸染3-5min,
9、蒸馏水洗数次,
10、10%甲醛液还原5-10min,
11、水洗2min,
12、用核固红染色10-15min,
13、水洗10min,各级酒精脱水,
14、常规透明,中性树胶封固。
结果:网状纤维黑色,核红色,胶原纤维黄棕色。
实验注意事项:
客户提供:
2、培养细胞:通过细胞计数取不少于2×106个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保存于冰箱(-80℃,避免反复冻融);
3、血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,保存(-80℃可长期保存,避免反复冻融);
4、血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(4℃可保存15-20天,-80℃可长期保存,避免反复冻融);
5、石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片等。
6、样本运输:可选择以下任何一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后,加冰袋寄送;
细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出);
血清或上清液直接加冰袋寄送(送视路程远近2-3天可到达)。
交付标准:
1、图片;
2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。
其他:
1、所使用的玻璃仪器,须用清洁液处理。
2、配制氨银溶液时,氨水加入的量不能过多或不足,过多感应下降,会使液体过碱,滴染时,切片容易脱落,过少则感应上升,浸染效果不佳,不好掌握。
3、配制氨银液时,有可能用玻璃蒸馏水。
4、使用的化学试剂应尽量用分析纯以上。
5、切片氧化漂白应彻底,不能使残存的福尔马林留于片上,否则将导致过早还原而使浸染不均匀。
6、如果有某种原因而导致切片脱落时,应使用涂胶的载片,以增加附贴性。
7、如有可能,氨银溶液以新配为佳,但也可保存于4℃冰箱中达一个月左右,这种液体易挥发,用后即须盖紧,当沉淀物出现时,该溶液应抛弃。
8、应秀氯化金调色时,可将胶原纤维着染的黄棕色去除掉。
晶莱生物病理类实验服务总览表
类别 | 服务项目 | 备注 | 说明 |
制 片 前 处 理 | 石蜡包埋 | 包埋1块 | 固定后组织按客户要求取材,脱水,包埋成蜡块(进口石蜡) |
特殊包埋(细胞、材料、眼球等) | 包埋1块 | 包埋要求难度较高(含特殊位置取材) | |
石蜡组织芯片 | 阵列点位包埋 | 客户提供供体蜡块及标本信息 | |
软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等) | 1块标本软化 | 较为坚硬组织软化处理 | |
骨组织脱钙(小) | 1块标本脱钙 | 最大面≤2cm²骨组织脱钙 | |
骨组织脱钙(大) | 1块标本脱钙 | 最大面>2cm²骨组织脱钙 | |
骨组织EDTA脱钙(小) | 1块标本脱钙 | 最大面≤2cm²骨组织EDTA脱钙 | |
骨组织EDTA脱钙(大) | 1块标本脱钙 | 最大面>2cm²骨组织EDTA脱钙 | |
石蜡白片 | 石蜡白片1片 | 组织防脱载玻片石蜡白片 | |
冰冻组织制备 | 冰冻包埋及前处理 | 4%多聚甲醛固定的组织或OCT包裹的新鲜组织(-80℃或液氮内保存,干冰运输) | |
冰冻切片 | 冰冻组织切片1片 | 同一组织连续切片3张以上免制备费 | |
染 色 | HE染色 | 染色含切片 | 苏木精-伊红染色法,观察组织形态 |
油红O染色 | 染色含冰冻切片 | 4%多聚甲醛固定,冰冻切片。对组织内脂质(如脂滴)染色 | |
番红O固绿染色 | 染色含切片 | 常用于植物、软骨组织形态染色 | |
Masson染色 | 染色含切片 | 观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度 | |
天狼猩红染色 | 染色含切片 | 观察组织纤维化程度,及偏振光进行胶原亚型的分区 | |
PAS糖原染色 | 染色含切片 | 观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化;肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化 | |
阿利新蓝染色 | 染色含切片 | 常用于软骨组织或早幼粒细胞、巨核细胞染色 | |
甲苯胺蓝染色 | 染色含切片 | 观察软骨组织形态或组织内肥大细胞的数量及分布 | |
尼氏染色 | 染色含切片 | 观察脑或脊髓等中枢神经系统内神经元尼氏体的变化 | |
LFB髓鞘染色 | 染色含切片 | 观察神经髓鞘的形态及变化 | |
普鲁士蓝染色 | 染色含切片 | 常用于吞噬细胞内铁粒子的含量和定位 | |
VG染色 | 染色含切片 | 显示组织胶原纤维及肌纤维的形态及变化 | |
EVG染色 | 染色含切片 | 观察血管弹性纤维的形态及变化 | |
VonKossa染色 | 染色含切片 | 观察组织内病理性钙沉积情况 | |
刚果红染色 | 染色含切片 | 一般用于组织淀粉样变染色 | |
维多利亚蓝染色 | 染色含切片 | 用于弹力纤维染色 | |
免疫 组化 | 免疫组化预式 | 染色含切片 | 试两个一抗浓度后拍照 |
免疫组化正式 | 染色含切片 | 客户提供一抗,常用二抗公司提供 | |
免疫组化芯片 | 染色含切片 | 免疫组化组织芯片染色 | |
免疫荧光(石蜡-单标) | 染色含切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 | |
免疫荧光(石蜡-双标) | 染色含切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 | |
免疫荧光(冰冻-单标) | 染色含冰冻切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 | |
免疫荧光(冰冻-双标) | 染色含冰冻切片和拍照 | 需实验前商定拍照倍数及视野 | |
抗体代购 | 详情请咨询工作人员 | ||
Tunel | Tunel(POD自带试剂盒) | 染色含切片 | 细胞凋亡染色,客户需提供Tunel试剂盒 |
Tunel(公司提供试剂盒) | 细胞凋亡染色,公司提供罗氏POD Tunel试剂盒 | ||
凋亡试剂盒代购 | 染色含切片 | 详情请咨询工作人员 |
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