网状纤维染色银染实验服务

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更新: 2021-04-26
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提供商: 晶莱生物
服务名称: 网状纤维染色银染实验服务
规格: 样本
实验技术简介:网状纤维(reticular fiber)网状纤维在疏松结缔组织中含量较少,纤维较细,有分支,彼此交织成网状。用浸银法可将纤维染成黑色,故又称嗜银纤维 (argyrophilic fiber)。电镜观察,网状纤维具有等间距的横纹结构,其化学成分也是胶原蛋白,和胶原纤维相似。网状纤维的嗜银性是由于包在原纤维上的糖蛋白所致。

 

实验技术原理:氨银液被组织吸咐与组织中的蛋白结合,经甲醛还原成黑色的金属银沉积于组织内及表面。用氯化金调色后,再用硫代硫酸钠液洗去未还原的银盐,从而将组织内的网状纤维清晰地显示出来。

实验操作流程:
1、切片脱蜡至水,蒸馏水洗,
2、用0.5%高锰酸钾氧化5min,
3、自来水洗,继用蒸馏水洗,
4、用2%草酸漂白切片2min,
5、自来水洗,蒸馏水洗,
6、2%硫酸铁铵媒染5min,
7、水洗,蒸馏水洗,
8、滴入氨性银溶液浸染3-5min,
9、蒸馏水洗数次,
10、10%甲醛液还原5-10min,
11、水洗2min,
12、用核固红染色10-15min,
13、水洗10min,各级酒精脱水,
14、常规透明,中性树胶封固。
结果:网状纤维黑色,核红色,胶原纤维黄棕色。


实验注意事项:

客户提供:

1、组织样品:新鲜组织放入液氮或-80度保存,组织不少于100mg;
2、培养细胞:通过细胞计数取不少于2×106个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保存于冰箱(-80℃,避免反复冻融);
3、血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,保存(-80℃可长期保存,避免反复冻融);
4、血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(4℃可保存15-20天,-80℃可长期保存,避免反复冻融);
5、石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片等。
6、样本运输:可选择以下任何一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后,加冰袋寄送;
细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出);
血清或上清液直接加冰袋寄送(送视路程远近2-3天可到达)。

交付标准:
1、图片;
2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。

其他:
1、所使用的玻璃仪器,须用清洁液处理。
2、配制氨银溶液时,氨水加入的量不能过多或不足,过多感应下降,会使液体过碱,滴染时,切片容易脱落,过少则感应上升,浸染效果不佳,不好掌握。
3、配制氨银液时,有可能用玻璃蒸馏水。
4、使用的化学试剂应尽量用分析纯以上。
5、切片氧化漂白应彻底,不能使残存的福尔马林留于片上,否则将导致过早还原而使浸染不均匀。
6、如果有某种原因而导致切片脱落时,应使用涂胶的载片,以增加附贴性。
7、如有可能,氨银溶液以新配为佳,但也可保存于4℃冰箱中达一个月左右,这种液体易挥发,用后即须盖紧,当沉淀物出现时,该溶液应抛弃。
8、应秀氯化金调色时,可将胶原纤维着染的黄棕色去除掉。

 

晶莱生物病理类实验服务总览表
 

类别 服务项目 备注 说明
      制
      片
      前
      处
      理
石蜡包埋 包埋1块 固定后组织按客户要求取材,脱水,包埋成蜡块(进口石蜡)
特殊包埋(细胞、材料、眼球等) 包埋1块 包埋要求难度较高(含特殊位置取材)
石蜡组织芯片 阵列点位包埋 客户提供供体蜡块及标本信息
软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等) 1块标本软化 较为坚硬组织软化处理
骨组织脱钙(小) 1块标本脱钙 最大面≤2cm²骨组织脱钙
骨组织脱钙(大) 1块标本脱钙 最大面>2cm²骨组织脱钙
骨组织EDTA脱钙(小) 1块标本脱钙 最大面≤2cm²骨组织EDTA脱钙
骨组织EDTA脱钙(大) 1块标本脱钙 最大面>2cm²骨组织EDTA脱钙
石蜡白片 石蜡白片1片 组织防脱载玻片石蜡白片
冰冻组织制备 冰冻包埋及前处理 4%多聚甲醛固定的组织或OCT包裹的新鲜组织(-80℃或液氮内保存,干冰运输)
冰冻切片 冰冻组织切片1片 同一组织连续切片3张以上免制备费
      染
      色
HE染色 染色含切片 苏木精-伊红染色法,观察组织形态
油红O染色 染色含冰冻切片 4%多聚甲醛固定,冰冻切片。对组织内脂质(如脂滴)染色
番红O固绿染色 染色含切片 常用于植物、软骨组织形态染色
Masson染色 染色含切片 观察组织纤维化和肌纤维的鉴别及组织纤维化程度
天狼猩红染色 染色含切片 观察组织纤维化程度,及偏振光进行胶原亚型的分区
PAS糖原染色 染色含切片 观察肝脏、肌肉等组织内糖原的变化;肠胃肺支气管等杯状细胞酸性粘液物质变化
阿利新蓝染色 染色含切片 常用于软骨组织或早幼粒细胞、巨核细胞染色
甲苯胺蓝染色 染色含切片 观察软骨组织形态或组织内肥大细胞的数量及分布
尼氏染色 染色含切片 观察脑或脊髓等中枢神经系统内神经元尼氏体的变化
LFB髓鞘染色 染色含切片 观察神经髓鞘的形态及变化
普鲁士蓝染色 染色含切片 常用于吞噬细胞内铁粒子的含量和定位
VG染色 染色含切片 显示组织胶原纤维及肌纤维的形态及变化
EVG染色 染色含切片 观察血管弹性纤维的形态及变化
VonKossa染色 染色含切片 观察组织内病理性钙沉积情况
刚果红染色 染色含切片 一般用于组织淀粉样变染色
维多利亚蓝染色 染色含切片 用于弹力纤维染色
    免疫
    组化
免疫组化预式 染色含切片 试两个一抗浓度后拍照
免疫组化正式 染色含切片 客户提供一抗,常用二抗公司提供
免疫组化芯片 染色含切片 免疫组化组织芯片染色
免疫荧光(石蜡-单标) 染色含切片和拍照 需实验前商定拍照倍数及视野
免疫荧光(石蜡-双标) 染色含切片和拍照 需实验前商定拍照倍数及视野
免疫荧光(冰冻-单标) 染色含冰冻切片和拍照 需实验前商定拍照倍数及视野
免疫荧光(冰冻-双标) 染色含冰冻切片和拍照 需实验前商定拍照倍数及视野
抗体代购   详情请咨询工作人员
   Tunel Tunel(POD自带试剂盒) 染色含切片 细胞凋亡染色,客户需提供Tunel试剂盒
Tunel(公司提供试剂盒) 细胞凋亡染色,公司提供罗氏POD Tunel试剂盒
凋亡试剂盒代购 染色含切片 详情请咨询工作人员

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