货号: | AD9024 |
生长状态: | 贴壁 |
年限: | 长久 |
运输方式: | 常温运输或干冰运输 |
器官来源: | 见说明书 |
是否是肿瘤细胞: | 见说明书 |
细胞形态: | 成纤维细胞样 |
免疫类型: | 见说明书 |
物种来源: | 小鼠 |
相关疾病: | 见说明书 |
组织来源: | 小鼠 |
品系: | 细胞系 |
ATCC Number: | 见说明书 |
细胞类型: | 见说明书 |
肿瘤类型: | 见说明书 |
供应商: | 上海信裕生物科技有限公司 |
数量: | T25培养瓶,1×106cells |
规格: | T25培养瓶,1×106cells |
细胞名称:小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14
物种:小鼠
规格:T25培养瓶,1×106cells
形态特征:成纤维细胞样
生长特性:贴壁
描述
该细胞是从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC3T3亚克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亚克隆14(ATCC CRL-2594)在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3亚克隆24(ATCC CRL-2594)和MC3T3亚克隆30(ATCC CRL-2596)在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化。
培养条件:α-MEM 10%FBS
传代方法:1:2传代;消化3-5分钟,3天可长满。
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶特点:细胞代数为2-3代
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
MC3T3-E1 Subclone 14细胞售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员,我们将尽快为您解决。
MC3T3-E1 Subclone 14细胞培养需要注意哪些问题
其实,刚刚复苏的细胞就像是刚刚出生的baby,非常脆弱,需要各位小伙伴的细心呵护,不然,细胞就会被我们花样玩死。为了避免细胞不明不白的挂掉,我们就要对细胞的各种习性了如指掌。1. 俗语道,到什么山上唱什么歌,不同细胞用不同的培养液。此时,就不得不提起培养基里的“四大金刚”—MEM、DMEM、1640、F-12,它们基本参与了90%以上种类细胞的培养过程。MEM能力非常全面,号称是应用最广泛的细胞培养液。DMEM作浓度要高出2~4倍,可分为高糖型(含葡萄糖4500mg/L)和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)。1640营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽,常用于淋巴细胞的培养。F12常用来支持CHO、Hela和L-细胞生长以及原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞的培养。MEM和F12这两种培养基各取1/2,即可形成神经生物学最通用的培养基。在此,奉送一个不同细胞系对应的不同培养液的图,供大家参考。
细胞名称 | 细胞类型 | 物种 | 来源组织 | 培养液与血清 |
293 | 成纤维细胞 | 人 | 胚胎肾 | MEM,10%马血清 |
3T6 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM,10%FBS |
A549 | 上皮样 | 人 | 肺癌 | F-12K,10%FBS |
A9 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 结缔组织 | DMEM,10%FBS |
AtT-20 | 上皮样 | 小鼠 | 肿瘤 | F-10,15%马血清+2.5%FBS |
BALB/3T3 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM,10%FBS |
BHK-21 | 成纤维细胞 | 仓鼠 | 肾 | DMEM,10%FBS or MEM,10%FBS and NEAA |
BHL-100 | 上皮样 | 人 | 乳腺 | McCoy,sA,10%FBS |
BT | 成纤维细胞 | 牛 | 鼻甲细胞 | MEM,10%FBS and NEAA |
Caco-2 | 上皮样 | 人 | 结肠腺瘤 | MEM,20%FBS and NEAA |
Chang | 上皮样 | 人 | 肝 | BEM,,10%牛血清 |
3. 当培养的贴壁细胞形态不好时,可在传代时,先倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清都可以)洗涤一次,用滴管吸走,再加入3ml培养基,沿着瓶底轻轻吹打一遍,然后吸走。这时在正式进行消化、吹打。其次,把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内,置于培养箱里培养,按时间点观察细胞贴壁情况(10min,20min,30min)。而后迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次,然后加入完全培养基培养并观察细胞生长情况以及形态。直至找到细胞完美的形态为止。
4. 至于在培养瓶中加入多少培养基量,则是需要实验汪们自己去摸索的。对于生长快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基,细胞形态会更好,但是要注意对换液时间的把握。
5. 如何选择培养瓶。一般,生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,那么采用塑料瓶会比玻璃瓶的效果好;生长速度快的细胞,用玻璃瓶培养的效果会更好。因此,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候(比如细胞刚复苏时或者原代培养),塑料瓶会好一点;而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
6. 细胞冻存时,盖子要拧紧,不然复苏水浴时会渗水,造成细胞污染。因而冻存管要选择原配的管子和盖子(不同牌子、型号的管子会有差别),盖子拧紧后最好用封口膜封住。且每支冻存管都要标上细胞的名称、冻存时间,并记录在册,以免后续复苏细胞时,取错细胞。
7. 细胞冻存时要严格进行梯度降温(-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮)。要知道冰火两重天的生活环境只会让娇弱的细胞自爆身亡,谨记:缓降温!但如果真心赶时间时,可以使用细胞冻存盒进行细胞冻存,而后尽快将其转入液氮中。此外,要定期测量液氮罐里的液氮储备,以保证细胞全部浸在液面下。
8. 细胞解冻时,由于冻存管管壁较厚、隔热,而导致水浴时间太长(2min还没融化)时,可以将水浴锅的温度调至40℃左右,可以缩短解冻时间。
9. 提前预定超净台,减少复苏后插在冰盒里等待的时间,可避免细胞房人满为患,超净台使用紧张,复苏1h后,还没有加入新的培养液。(高浓度DMSO防止胞内形成冰晶,冻存时保护细胞,但复苏融解后,浸泡时间太久会对细胞有毒性)10. 复苏细胞时一定要有耐心,因为有些细胞在复苏一星期后才会真正有起色。因而,尽管细胞在复苏三四天后没有任何动静,也不要轻易倒掉所有细胞,要耐心等待,两周后再做决定。
11. 有关DMSO的一些注意事项:(1) DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中,降低冰点、延缓冻存过程,同时提高细胞内的离子浓度、减少细胞内冰晶的形成,从而减少细胞损伤程度。(2) DMSO在溶解过程中会放热,应先与培养基混匀后再加血清,同时冻存液最好提前配置,DMSO现配对细胞的毒性可能更大;(3) 复苏时,要离心去除DMSO,并用新鲜的培养基洗涤1-2次,注意离心的时候速度不要太快。