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| 货号： | RNCL-002 |
| 数量： | 100万 |
| 规格： | 1ml/T25 |
大鼠胶质瘤细胞(C6)
货号：RNCL-002
细胞介绍
胶质细胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea诱导的大鼠胶质瘤克隆，并经过一系列的体外培养和动物传代交替后建成的。当细胞从低密度生长到满瓶时，S-100产量增加10倍。
细胞特性
- 来源：大鼠，胶质瘤
- 形态：成纤维细胞，贴壁生长
- 含量：>1x106 个/mL
- 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存：使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后，请先在显微镜下检查细胞生长状态，并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后，再次检查细胞状态。若状态良好，可按照以下细胞培养步骤进行细胞后续处理操作。若发现可疑污染物，请及时与我们取得联系。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
- 准备F12K培养基(F12K，SIGMA,货号N3520，添加NaHCO3 2.5g/L)，82.5%；马血清，15%；优质胎牛血清，2.5%。
- 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
- 细胞处理：
- 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
赛百慷（上海）生物技术股份有限公司
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