大鼠原代心肌细胞_受体系(细菌)_细胞_生化试剂库_商城

货号：	ME-2002006
规格：	1×106cells/管

iMedcell ^® 大鼠原代心肌细胞

●大鼠原代心肌细胞规格：1×10⁶cells/管
●大鼠原代心肌细活细胞运输：收到细胞后，请立即放入培养箱中培养；
大鼠原代心肌细冻存细胞运输：可暂存于-80℃冰箱或液氮长期储存。

大鼠原代心肌细胞产品简介：
大鼠原代心肌细胞产品是一种高纯度、高活性的细胞产品。该产品采用埃德斯生物的无血清、化学成分明确的大鼠原代心肌细胞分离试剂盒进行细胞分离、培养，可分离得到高纯度、高活性的原代心肌细胞，这些细胞具有典型的心肌细胞电生理特性，自律性、兴奋性、传导性、收缩性。

大鼠原代心肌细胞包含材料：

产品货号	名称	规格	数量
ME-2002006	大鼠原代心肌细胞	1×10⁶	1瓶(支)
ME-1002017	大鼠心肌细胞分离试剂盒	100 ml	1瓶

实验材料
●实验试剂
大鼠原代心肌细胞分离试剂盒（iMedCell: Cat. no.ME -1002017）
●实验仪器设备
六孔板/十二孔板
二氧化碳培养箱
实验准备
A. 使用75%酒精擦拭试验台；
B. 准备酒精灯、酒精棉及用于盛放实验处理后大鼠的垃圾袋；
C. 剪刀、镊子、微型镊子等解剖用具需提前进行灭菌处理；
D. 吸取适量Wash Buffer至培养皿中并放置于冰上（细胞房内操作）。
注意：细胞房和超净工作台需提前进行紫外灭菌处理；培养皿大小的选择取决于实验时所取心脏的数目，Wash Buffer一直放于冰上保持低温。

Cell Dissociation Solution在4℃融化，快速分装，并放-20℃长期保存，不要反复冻存。

F. 培养板分别用Ready-to-use Gel Ⅰ，Ready-to-use Gel Ⅱ提前60min包被。
操作方法

取心脏

左手捏住大鼠背部皮肤，使用酒精棉（75%酒精）擦拭小鼠胸腹，用解剖剪在小鼠剑突处正中线偏左向上剪开，略压胸骨，使心脏自然跳出，用弯镊子勾住心脏根部，取出心脏，置于盛有遇冷Wash buffer的培养皿中。
在解剖镜下使用微型镊子和解剖剪剪去心房。

组织清洗

经酒精擦拭后，将培养皿移入细胞房超净工作台，用预冷的Wash buffer清洗3次，去除血污后，将心脏剪成约1mm³的组织块，再清洗2次。

预消化

加入1-3ml Cell Dissociation Solution ，37℃水浴中摇动，消化1min后弃上清。

消化

在50ml离心管中加入Cell Dissociation Solution，37℃水浴中摇动消化7min后将上清液加入遇冷的1ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium中，混合均匀并置于冰上，保持低温。

注意：每次Cell Dissociation Solution使用的量可根据组织块的多少进行调整。

重复4.A的步骤直至组织完全消化。

注意：吸取上清时尽量避免吸出沉淀。

将收集的上清在室温下1260rpm，离心5min，轻轻吸除上清，用Rat Cardiomyocytes Culture Medium重悬细胞。

差速贴壁：

取出Ready-to-use Gel Ⅰ提前包被的培养板，吸掉培养板中液体。将重悬的细胞经过70um/100μm滤膜过滤后铺入包被好的培养板中，放入细胞培养箱（37℃，5%CO₂）中孵育60min。

细胞铺板：

Ready-to-use Gel Ⅱ提前包被培养板，吸掉上清，60min后，取上一步差速贴壁上清，并将未贴壁细胞转移至包被好的培养板中。
取出培养皿，将上清移入15ml离心管中，1260rpm，离心5min，轻轻吸除上清，用已经预先加热至37℃的1-2ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium重悬细胞。利用血细胞计数板进行细胞计数，用台盼蓝检测细胞存活率。根据所计的细胞数使用Rat Cardiomyocytes Culture Medium进行稀释调整细胞浓度，将细胞移至预先使用Ready-to-use GelⅡ包被过的48孔板或3.5cm培养皿中。

细胞培养

将培养板放入细胞培养箱中培养24h后观察细胞状态，若细胞状态佳且浓度合适，则可进行后续实验。

大鼠心肌细胞产品图

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大鼠原代心肌细胞

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