细胞株_受体系(细菌)_细胞_生化试剂库_商城

货号：	CL012
生长状态：	良好
年限：	液氮长期
运输方式：	干冰
器官来源：	mice
是否是肿瘤细胞：	否
细胞形态：	饱满
免疫类型：	特异性免疫
物种来源：	mice
相关疾病：	肿瘤
组织来源：	mice
品系：	传代细胞系
细胞类型：	杂交瘤
肿瘤类型：	其他组织肿瘤
供应商：	大庆麦伯康生物技术有限公司
数量：	大量
规格：	T75瓶或者1mL冻存管包装

细胞特性
1）来源：小鼠
2）形态：贴壁生长时，呈上皮细胞样；悬浮生长时，呈圆球形。
3）含量：>1x10⁶ 个/mL
4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5）规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。

细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备本公司生产的MD-6培养基直接培养；或者IMDM培养基(GIBCO,货号12200036)，90%；优质胎牛血清，10%，添加添加0.1mM次黄嘌呤，0.016mM胸腺嘧***，100nM氨甲喋呤。
用于表达蛋白时，也可使用悬浮培养基，使细胞悬浮生长。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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