TurboKnockout与CRISPR-Pro基因敲除

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更新: 2021-05-16
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规格: 基因敲除小鼠


一、TurboKnockout®基因敲除

 
活动时间:
2016年8月20日——2016年10月31日
活动对象:
科研终端客户

 
传统ES打靶基因敲除因嵌合体阳性率较低,并且需要与工具鼠交配才能获得删除Neo的杂合子,因此构建周期长达12-16个月。如何跨越“嵌合体”阶段并自删除Neo以 减少两代繁育时间,才是真正快速的关键。
 
升级前的TetraOneTM
实现跨越“嵌合体”阶段
基于ES打靶的TetraOneTM技术,是采用了独特的建系和基因改造技术建立了具有高效遗传优势的TetraOneTM ES细胞系,通过特定胚胎发育阶段的显微注射,使TetraOneTM ES细胞100%代替内源ES细胞,从而实现跨越“嵌合体”阶段,把ES打靶构建周期短至6-8个月。
 
升级后的TurboKnockout®
实现跨越“嵌合体”阶段且自删除Neo,减少两代繁育时间
升级后的TetraOneTM即TurboKnockout®,采用独特的Self-deleting Neo Cassette所获得的嵌合体与任何品系小鼠交配,都可百分百自删除Neo。TurboKnockout®不仅仅实现跨越“嵌合体”阶段, 还能真正自删除Neo从而快速获得去Neo的杂合子小鼠。

TurboKnockout®技术对比

 
技术类型 TurboKnockout® TetraOneTM 传统ES打靶
构建周期 6个月 6-8个月 10-12个月
脱靶效应
跨越“嵌合体”阶段 ×
实现自删除Neo × ×


TurboKnockout®技术优势
 
  • 基因修饰准确、效果稳定;
  • 没有脱靶效应,可胜任复杂的基因敲除;
  • 自删除Neo可进一步缩短服务周期,简化了小鼠交配流程。

服务周期与价格
 
服务项目 TurboKnockout®基因敲除小鼠
服务周期 6-8个月
服务承诺 4只TurboKnockout®小鼠
服务原价 12万
活动价格 10万

二、CRISPR-Pro基因敲除


活动时间:
2016年8月20日—2016年10月31日


活动对象:
科研终端客户

 
CRISPR-Pro技术原理
CRISPR-Pro技术建立在传统CRISPR/Cas9技术上,沿用核酸酶介导的基因修饰技术体系,采用独特的受精卵处理方式使受精卵偏好同源重组修复路径,进而提高同源重组效率。Cas9/gRNA复合物在靶位点进行切割,产生双链断裂(DSB:Double-strand break),迫使细胞进行紧急修复。通常条件下,细胞偏向于使用非同源末端连接(NHEJ:nonhomologous DNA end joining)的方式对断裂的双链进行修复,进而造成靶位点基因的插入/缺失突变。CRISPR-Pro独特的受精卵处理方式,极大地提高了同源重组修复(HDR:Homology-directed recombination or repair)路径的效率,使得DNA大片段敲入(KI)及条件性敲除(cKO)得以实现。


CRISPR-Pro技术优势
 
  • 周期短,效率高;
  • 高嵌合率,生殖遗传稳定;
  • 可实现DNA大片段敲入 (长达10 Kb);
  • 可实现条件性敲除;
  • 可实现大片段敲除。
 
Jackson Lab CRISPR/Cas9基因编辑效率 VS Cyagen CRISPR-Pro基因编辑效率
项目类型 基因敲除效率对比
CRISPR/Cas9(Jackson Lab) CRISPR-Pro(Cyagen)
基因移码敲除 高效 高效
基因片段敲除 高效 高效
点突变/小标签基因敲入 一般 高效
cDNA片段基因敲入 (≤4 kb) 效率较低 高效,可长达 10 kb
条件性基因敲除 效率较低 高效,可长达 4 kb
与Jackson Lab展示的CRISPR/Cas9基因编辑效率相比,赛业生物(Cyagen)CRISPR-Pro在敲入片段长度与敲入效率方面都更具优势。


服务周期与价格
 
服务项目 服务周期 服务承诺 服务原价 活动价格
完全性基因敲除小鼠 4-6个月 4只F1 53888元 45000元
条件性基因敲除小鼠 6-8个月 3只F1 120000元 95000元
点突变小鼠 6-8个月 3只F1 75000元 60000元



 
赛业模式生物研究中心:
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