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份 库存999份
| 货号： | GM01-500T |
| 供应商： | 上海歌凡生物科技有限公司 |
| 数量： | 大量 |
| 英文名： | MTT Kit |
| 保质期： | 6个月 |
| 保存条件： | -20度保存 |
| 规格： | 500T |
货号GM01-500T
原 理：
- MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物Formazan。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
- 本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。从而避免了由于去除培养液时Formazan被部分去除而引起的误差。
- 本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。本试剂盒可以测定500个样品。
- 包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| GM01A | MTT | 25mg |
| GM01B | MTT溶解剂 | 5ml |
| GM01C | Formazan溶解液 | 55ml |
- 4℃或-20℃保存，MTT需避光保存，一年有效；MTT配制成溶液后需-20℃避光保存；Formazan溶解液也可以室温保存。
使用说明：
1. MTT溶液的配制：用5ml MTT溶解剂溶解25mg MTT，配制成5mg/ml的MTT溶液。配制后即可使用，或直接-20℃避光保存，也可以根据需要适当分装后-20℃避光保存。
2.通常细胞增殖实验每孔加入100ul 2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100ul 5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定)。按照实验需要，进行培养并给予0-10微升特定的药物刺激。
3.每孔加入10ul MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育4小时。
4.每孔加入100ul Formanzan溶解液，在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会长一些。
5. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片，可以使用560-600nm的滤光片。
注意事项：
- 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
- MTT溶剂在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
- MTT配制成溶液后为黄色，需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
- Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
- 需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。
- MTT一般最好现用现配，过滤后4℃避光保存两周内有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加，没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
- MTT有致癌性，用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感；往96孔板加时不避光也没有关系，毕竟时间较短，或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
温馨提示：不可用于临床治疗。
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