SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

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单价: 320.00
品牌: EnoGene
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更新: 2021-04-06
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货号: E1WP302
供应商: Enogene
数量: 999
规格: 50.0
EnoGene™ SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
(EnoGene™ SDS-PAGE Gel Preparation Kit)

一、产品介绍
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。
本试剂盒约可配制10-50块常规大小的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。
二、试剂盒组份
组   份 E1WP302  储存
30% Acr-Bis(29:1) 100 mL 4℃
1M Tris-HCl, pH8.8 100 mL 4℃
1M Tris-HCl, pH6.8 25 mL 4℃
10% SDS 5mL 4℃
Ammonium Persulfate(过硫酸铵) 1g 4℃
TEMED 0.5mL 4℃
三、试剂盒以外自备仪器和试剂
可调移液器、垂直板电泳仪、双蒸水
四、操作步骤
1、 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
6%胶 50-150kD
8%胶 30-90kD
10%胶 20-80kD
12%胶 12-60kD
15%胶 20kD以下
2、 按照下面的配方进行配制(总体积为15ml),如有体积变动可按比例进行放大或缩小。过硫酸铵配制成10%溶液后(0.5g中加入4.5ml蒸馏水溶解),分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
         注:如果配制非变性胶,参考上述配方,不加10%SDS即可配制成非变性PAGE胶。
贮液(ml) 分离胶中丙烯酰胺的终浓度(%)
  6 8 10 12 15
蒸馏水 6.0 5.0 4.0 3.0 1.5
30% Acr-Bis(29:1) 3.0 4.0 5.0 6.0 7.5
1M Tris-HCl, pH8.8 5.7 5.7 5.7 5.7 5.7
10% SDS 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15
10%的过硫酸铵 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15
TEMED 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01


3、 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶):
成分 配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升)
5%胶 2 3 4 6 8 10
蒸馏水 1.4 2.1 2.7 4.1 5.5 6.8
30% Acr-Bis(29:1) 0.33 0.5 0.67 1.0 1.3 1.7
1M Tris-HCl, pH6.8 0.25 0.38 0.5 0.75 1.0 1.25
10% SDS 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
10%的过硫酸铵 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01

五、注意事项:
1、 所过硫酸铵配制成10%溶液后,应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间,以防失效。 
2、 TEMED宜避光保存。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3、 请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、 
六、保存条件:
1M Tris-HCl, pH8.8、10% SDS、Ammonnium persulfate (过硫酸铵) 粉末和1M Tris-HCl, pH6.8室温或4℃保存。30% Acr-Bis (29:1)和TEMED 4℃避光保存。
过硫酸铵配制成10%溶液后(0.5g中加入4.5ml蒸馏水溶解,1g中9ml蒸馏水溶解),分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。


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温馨提示:不可用于临床治疗。