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| 货号： | BW12002 |
| 保存条件： | 4度 |
| 供应商： | 百恩维生物 |
| 规格： | 1000ml |
免疫细胞无动物源培养基
★ 产品描述
免疫细胞无动物源培养基（BW12002）是百恩维生物开发，可用于人免疫细胞临床治疗研究的无动物源培养基，生产过程符合cGMP的标准规范。可用于人类体外组织及细胞培养过程中的应用。
★ 产品特点
1、无动物源培养基，无添加细胞因子。
2、无异源动物成分，化学成分明确。
3、 培养性能优越，支持高密度单核细胞培养。
★产品组成
1、基础培养基 1000ml
2、ICSFMGS 10ml
3、庆大/链霉素双抗 10ml
★ 产品应用
1、DC细胞、CIK细胞和NK细胞的长期增殖培养。
2、PBL细胞和TIL细胞的长期增殖培养。
3、单核细胞和巨噬细胞的长期增殖培养。
4、T淋巴细胞的长期增殖培养。
★ 操作步骤
使用方法：
将产品组成中的ICSFMGS和双抗解冻后，加入基础培养基中混匀使用。
培养过程：
以下过程作为常规免疫细胞培养的一般准则，如需在生物反应器或培养袋中高密度培养，应优化条件来确定最佳的操作步骤。
T细胞培养：
1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC），或根据标准的外周血单个核细胞解冻程序，在37°C的水浴，快速解冻（〈1分钟）冻存的外周血单个核细胞。
2、用生理盐水洗涤细胞，根据需要也可加入2-5％热灭活的的人自体血浆。
3、用电子（即Coulter计数器，VI-细胞）或手动的方法（即血球计数仪）给细胞计数。
4、离心细胞，清除洗涤缓冲液。
5、培养初期，用含细胞因子（如IL-2）的培养基重悬PBMC，CD3 + T细胞密度保持在大约0.5-1×106/ml，转移细胞到相应的细胞培养容器（培养袋、培养瓶）。随后可应用各种操作激活T细胞，包括添加刺激的抗体或抗原呈递细胞。无论培养T细胞的规模大小，细胞均可被隔离，激活和扩大。
6、在37℃，5％CO2的潮湿培养箱中培养细胞，给予并维持细胞在对数期生长所需要的营养。为了保持细胞在对数期的增长，当细胞密度超过1×106/ml时，需要分离传代，维持细胞密度在0.5-1×106/ml（例如，2×106个细胞/ml以上，按1：4比例0.5x106细胞/ml）。在静态平板培养中为了获得最佳的气体交换，建议培养基深度不超过1到1.2厘米。
单核细胞树突状细胞培养：
1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC）。
2、将外周血单个核细胞铺在培养瓶中，加入适量免疫细胞无动物源培养基（货号BW12002）。
3、在37℃，5% CO2的恒温培养箱中孵育2〜3小时。
4、弃掉含非贴壁细胞的培养基。
5、用生理盐水洗涤贴壁细胞（主要是CD14 +单核细胞）三次。
6、添加重组人IL-4和重组人GM-CSF到免疫细胞无动物源培养基， 至终浓度分别为50～100 ng/ml和50 ng/ml，并以此培养基培养贴壁细胞。保持细胞密度在1～3x105细胞/cm2之间。研究者可视情况加入灭活的人自体血浆。
7、在37℃，5% CO2的潮湿培养箱中连续孵育5天，建议培养3天左右已添加了IL-4和GM-CSF的免疫细胞无动物源培养基换液，换液过程保留贴壁和不贴壁的所有细胞。
8、培养6天之后，细胞表现出典型的树突状细胞的形态和表面标记（细胞CD1a，CD80，CD86，HLA-DR）。
9、向培养基中添加1ng/ml的LPS或者50ng/ml的TNF-α诱导的树突状细胞的成熟。
★ 相关产品
细胞因子IL2 （货号RP1009）
细胞因子IL4 （货号RP1013）
集落刺激因子 GM-CSF （货号RP1011）
肿瘤坏死因子α TNF-α （货号RP1004）
人间充质干细胞无动物源培养基 （货号BW110024）
人间充质干细胞培养基 （货号BW110011）
★ 产品描述
免疫细胞无动物源培养基（BW12002）是百恩维生物开发，可用于人免疫细胞临床治疗研究的无动物源培养基，生产过程符合cGMP的标准规范。可用于人类体外组织及细胞培养过程中的应用。
| 产品货号 | 产品规格 | 贮藏条件 | 有效期 | 运输 |
| BW12002 | 1000ml | 2～8℃避光保存 | 14个月 | 冰袋运输 |
★ 产品特点
1、无动物源培养基，无添加细胞因子。
2、无异源动物成分，化学成分明确。
3、 培养性能优越，支持高密度单核细胞培养。
★产品组成
1、基础培养基 1000ml
2、ICSFMGS 10ml
3、庆大/链霉素双抗 10ml
★ 产品应用
1、DC细胞、CIK细胞和NK细胞的长期增殖培养。
2、PBL细胞和TIL细胞的长期增殖培养。
3、单核细胞和巨噬细胞的长期增殖培养。
4、T淋巴细胞的长期增殖培养。
★ 操作步骤
使用方法：
将产品组成中的ICSFMGS和双抗解冻后，加入基础培养基中混匀使用。
培养过程：
以下过程作为常规免疫细胞培养的一般准则，如需在生物反应器或培养袋中高密度培养，应优化条件来确定最佳的操作步骤。
T细胞培养：
1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC），或根据标准的外周血单个核细胞解冻程序，在37°C的水浴，快速解冻（〈1分钟）冻存的外周血单个核细胞。
2、用生理盐水洗涤细胞，根据需要也可加入2-5％热灭活的的人自体血浆。
3、用电子（即Coulter计数器，VI-细胞）或手动的方法（即血球计数仪）给细胞计数。
4、离心细胞，清除洗涤缓冲液。
5、培养初期，用含细胞因子（如IL-2）的培养基重悬PBMC，CD3 + T细胞密度保持在大约0.5-1×106/ml，转移细胞到相应的细胞培养容器（培养袋、培养瓶）。随后可应用各种操作激活T细胞，包括添加刺激的抗体或抗原呈递细胞。无论培养T细胞的规模大小，细胞均可被隔离，激活和扩大。
6、在37℃，5％CO2的潮湿培养箱中培养细胞，给予并维持细胞在对数期生长所需要的营养。为了保持细胞在对数期的增长，当细胞密度超过1×106/ml时，需要分离传代，维持细胞密度在0.5-1×106/ml（例如，2×106个细胞/ml以上，按1：4比例0.5x106细胞/ml）。在静态平板培养中为了获得最佳的气体交换，建议培养基深度不超过1到1.2厘米。
单核细胞树突状细胞培养：
1、准备新鲜的外周血单个核细胞（PBMC）。
2、将外周血单个核细胞铺在培养瓶中，加入适量免疫细胞无动物源培养基（货号BW12002）。
3、在37℃，5% CO2的恒温培养箱中孵育2〜3小时。
4、弃掉含非贴壁细胞的培养基。
5、用生理盐水洗涤贴壁细胞（主要是CD14 +单核细胞）三次。
6、添加重组人IL-4和重组人GM-CSF到免疫细胞无动物源培养基， 至终浓度分别为50～100 ng/ml和50 ng/ml，并以此培养基培养贴壁细胞。保持细胞密度在1～3x105细胞/cm2之间。研究者可视情况加入灭活的人自体血浆。
7、在37℃，5% CO2的潮湿培养箱中连续孵育5天，建议培养3天左右已添加了IL-4和GM-CSF的免疫细胞无动物源培养基换液，换液过程保留贴壁和不贴壁的所有细胞。
8、培养6天之后，细胞表现出典型的树突状细胞的形态和表面标记（细胞CD1a，CD80，CD86，HLA-DR）。
9、向培养基中添加1ng/ml的LPS或者50ng/ml的TNF-α诱导的树突状细胞的成熟。
★ 相关产品
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人间充质干细胞无动物源培养基 （货号BW110024）
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温馨提示：不可用于临床治疗。
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