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【分享】环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Is... 已解决
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【分享】环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification, LAMP)专题讨论
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2007-07-23 16:41
mylab,您好！我最近用官方软件设计了一套引物做LAMP，跑出了梯形条带，但是LAMP的最小条带比用外引物跑出来的条带要小这是什么原因啊？望指教！！！
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2007-07-30 21:56
我还想问一下，LAMP的最小条带到底是从哪到哪啊，很困惑。还有如何分析条带是否是目的条带还是非特异性扩增，还是只要能跑出梯形条带就能证明试验成功了呢？
急需帮助 |
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2007-07-31 02:42
zhysh1231
LAMP的大多数产物，是FIP和BIP扩增出来的，最小条带应该比用外引物跑出来的条带要小。如果用了环状引物，应该更加明显一些。但差别应该不明显，如果您的最小条带是<100bp，应该是引物多聚体。 如何分析条带是否是目的条带还是非特异性扩增。LAMP的扩增，是4或6对引物针对靶序列的6或8个区域，特异性是非常的好。一般只要能跑出梯形条带就能证明试验成功了。如果不放心，可在F1和B1之间选择一个内切酶酶切，能够得到特定大小条带；更保险的办法就是做个Southern杂交了。 建议再好好学习一下第一篇LAMP的文章，见NAR, 2000, 28(12):e63。 |
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