【求助】紧急求助！标准曲线制作..._荧光染料标准品_标准品_生化试剂_知道

游客	收藏 \| 举报 2006-10-27 01:04 关注：217 回答：3 【求助】紧急求助！标准曲线制作... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-22 11:21 【求助】紧急求助！标准曲线制作

游客	举报 2006-10-28 18:13 第二张图如下

游客	举报 2006-10-27 16:27 我想从两个方面来回答你的问题，一，你的质粒标准品在进行稀释时，你稀释的准确吗，一般是多取一点原样进行稀释以减少稀释误差；二，你用的荧光染料SYBR GREEN I，此种染料可以跟所有的双链DNA结合，包括引物二聚体，包括其它的非特异性扩增，不知道你分析了你的熔解曲线了没有，看看是不是只有一个峰？建议你把你的熔解曲线的图也传上来。标准曲线好的话一般要求R^2＝0.99以上呢，至少应该是两个9。

游客	举报 2006-11-03 15:18 谢谢你。我是在别人实验室做的real-time，没有要到SDS的安装软件。明天我去把融解曲线拷下来，再请你看看。可能我稀释不准确，我是用TE稀释的，取1ul 50ng/ul的溶液+9ul TE得到5ng/ul的溶液，再从1ul 5ng/ul的溶液+9ul TE得到0.5ng/ul的溶液，以此类推，得到7 个浓度的标准模板系列。是不是稀释不准确？

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