【求助】大公司的大鼠抗小鼠单克隆抗体检出好几条带，是不是同源..._抗小鼠_二抗_抗体类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2007-10-04 11:50 关注：257 回答：3 【求助】大公司的大鼠抗小鼠单克隆抗体检出好几条带，是不是同源... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-11-16 13:47 【求助】大公司的大鼠抗小鼠单克隆抗体检出好几条带，是不是同源性太高了？

游客	举报 2007-10-04 18:38 应该是抗体浓度太高了相应降低下

游客	举报 2007-10-05 08:47 感谢斑竹解答。我看到有些帖子提到过IgG重链（40-60kd）和轻链（15-20kd）的问题，我这会不会是抗大鼠IgG的二抗检测出了小鼠的IgG重链和轻链呢？

游客

举报 2007-10-05 09:06

你先降低一抗二抗的浓度试一试,
如果26KD和54KD还有,而且很明显的话,
再做个阴性对照,只加二抗,不加一抗,如果还有条带的话,说明是二抗引起的

抗大鼠IgG的二抗是有可能检测到小鼠的IgG重链和轻链的,
因为IG的抗原性主要在constant region ,这些功能区不同物种间还是有一定同源性的
你的蛋白样品是不是来源于细胞的?
如果是,应该不会有ig,
除非是一些脾,血管,肝肾了什么组织,不排除这种可能性

补充一点，最近我师姐做大鼠肾组织的 WB，二抗用抗小鼠IgG,
总会在25和50KD的地方出现条带，她做的是肾纤维化模型
而且正常对照组条带淡，模型组条带浓，用药之后比模型又降低，
她以前做过不加一抗的对照，这两条带总存在
推测是一些病理性IgG在肾组织内沉积。