• 游客
收藏 | 举报 2016-10-08 10:27   关注:210   回答:7

载体构建,菌落PCR酶切鉴定都正确,测序无目的片段...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-22 13:50
载体构建,菌落PCR酶切鉴定都正确,测序无目的片段

我来回答
  • 游客
举报 2016-10-17 22:54

我用了很多年的病毒载体,各种病毒也包过非常多,欢迎大家来我的病毒包装与质粒转染精华答疑贴答疑

贴子链接:腺相关病毒包装(AAV)、慢病毒包装、腺病毒包装、细胞转染、病毒在体转染【技术答疑】

  • 游客
举报 2016-10-08 23:28

如果你确认酶切没问题,换家测序公司测序

  • 游客
举报 2016-10-11 19:33
应该是小片段污染,插入进去的都是很短的序列
  • 游客
举报 2016-10-08 13:52

把转化后的全部质粒全都送去测序(先不验证)。因为测序结果是最有说服力的。筛选测序返回的结果,最后对序列正确的质粒做PCR及酶切验证。

  • 游客
举报 2016-10-15 13:48
实在不行你就用同工酶进行无缝连接吧,这样省事还省钱,成本差不多
  • 游客
举报 2016-10-19 23:22
重新做一遍。或者外包
  • 游客
举报 2016-10-09 17:44
楼主发现是什么原因了吗?我现在构载体,情况和你的一样,很苦恼,求告知原因