紧急求助：怎样去除cDNA文库构建过程中的核糖体RNA？..._RNA文库制备试剂盒_二代测序_分子类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2004-06-29 16:25 关注：253 回答：3 紧急求助：怎样去除cDNA文库构建过程中的核糖体RNA？... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-07-04 02:08 紧急求助：怎样去除cDNA文库构建过程中的核糖体RNA？

游客

举报 2004-07-01 19:53

你用什么构建cDNA文库？有些试剂盒是要用mRNA开始反转录的，如STRATAGEN的入 ZAP Vector（我用过，不过把其中需要放射性的东西都去掉了，最后有>10~6 pfu），CLONTEC 的试剂盒好像可以直接用total RNA 做的，最后经过PCR扩增富集cDNA，可能用起来会比较方便，Invitrogen 的Gateway 技术在把目的片段接到别的载体里时比较好用。如果你用的试剂盒要求用mRNA的话，最好还是抽提一下mRNA，QIAGEN 的Oligotex用起来还好，有能直接从组织中抽提的，也有从totalRNA中抽提的，还有别的公司的那种用磁珠上面连oligo dT的方法的，可能更方便，不过要有专门的仪器，还有一些用纤维素连oligo dT的，但是效果不好。

游客	举报 2004-07-04 03:23 谢谢zhongmindai 战友的指教，我用的是Clontech 的SMART™ cDNA Library Construction Kits 。zhongmindai 战友，你觉得这些试剂盒中哪款最好？

游客	举报 2004-07-04 15:32 我也想知道怎样去除rR2NA，有何办法啊？**方法，谢谢！