恒温PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别？哪个更有优势..._定量PCR_分子诊断_分子类_知道

游客	收藏 \| 举报 2017-10-01 22:19 关注：200 回答：3 恒温PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别？哪个更有优势... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-22 10:52 恒温PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别？哪个更有优势？

游客

举报 2017-10-11 02:01

实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
恒温PCR和实时荧光定量PCR的不同，是不同在实时荧光定量PCR的系统中加入了荧光染料（SYBR Green 或Taqman 探针等等）。以SYBR Green为例，这种染料可以结合在双链的DNA上，当PCR不断进行时，每一次退火生成的双链DNA也在增加，荧光染料结合也越多，荧光也越强。在机器中有一个探测荧光的探头，可以定量检测荧光的强度，转换成数值。这样就可以实时记录反映体系中DNA的反应情况。
荧光PCR更有优势，因为荧光PCR灵敏度高于恒温PCR，同样价格也高一些。

游客	举报 2017-10-12 04:08 实时荧光PCR方法灵敏度略高于恒温PCR，但仪器昂贵，试剂消耗也相对更贵，适合向高端客户推广；恒温PCR大部分性能与实时荧光PCR相对，灵敏度稍低于实时荧光PCR，但仪器性价比高，更利于推广。实际推广中对高端客户可以采取用恒温PCR作为契机，在交流中如客户对灵敏度有高要求而又有一定实力的可推荐使用实时荧光PCR产品。

游客	举报 2017-10-07 22:35 恒温PCR主要是，确定是否存在一段特异的DNA序列。但是荧光定量PCR是看溶液中特异的PCR序列的浓度。两者没有什么优势。一般的可能就是功能简单但是便宜。主要是便宜荧光的很贵很贵不是一般的贵！！实时荧光PCR方法灵敏度略高于恒温PCR，但仪器昂贵，试剂消耗也相对更贵，适合向高端客户推广；恒温PCR大部分性能与实时荧光PCR相对，灵敏度稍低于实时荧光PCR，但仪器性价比高，更利于推广。实际推广中对高端客户可以采取用恒温PCR作为契机，在交流中如客户对灵敏度有高要求而又有一定实力的可推荐使用实时荧光PCR产品。

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