不同转染试剂为什么会有强弱表达的差别..._转染试剂_基因编辑_分子类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2017-10-03 02:49 关注：192 回答：1 不同转染试剂为什么会有强弱表达的差别... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-22 11:32 不同转染试剂为什么会有强弱表达的差别

游客

举报 2017-10-06 09:29

不同的转染试剂有不同要求，生物通小编个人经验是转染试剂细胞毒性高的要求长满一些，细胞多一些，就算死伤惨重也还能留下多些活口，嘿嘿，对于质粒转染来说这并非评判转染试剂好坏的标准，毕竟只要转进去就算OK 了，但是对于RNAi 实验来说就不同了），将siRNA 和转染试剂混合物加入共同温育一段时间，更换培养基，再培养 24－48 小时检测mRNA 含量等等。创新的方法是反向转染。这种方法称为 everse tr ansfection 或者neofection，和传统转染方法相比区别在于，传统方法需要提前一天接种铺板，培养24 小时后等细胞到一定汇合度再加转染复合物转染；而反向转染则是不用预先接种细胞，先加入转染试剂和siRNA 混合物在培养板上共同温育，然后再加入细胞铺板，培养。这个方法的好处不单是可以节约一整天的时间，而且转染效率高。