【交流】阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFN、TALEN、CR..._CRISPR基因敲除_基因编辑_分子类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2018-01-22 16:00 关注：264 回答：4 【交流】阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFN、TALEN、CR... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-11-17 01:42 【交流】阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法

游客	举报 2018-01-30 05:51 关注一下

游客	举报 2018-02-03 03:55 确实不错。谢谢分享

游客	举报 2018-01-27 22:58 分析敲除位点的上下游序列，设计合适的引物PCR扩增目的基因片段，与野生型目的基因杂交后CruiserTM酶切15-20分钟，酶切产物1.5%-2%凝胶电泳。请问一下，如何做到与野生型的目的基因杂交？？

游客	举报 2018-01-26 06:07 T7 核酸内切酶 I 识别双链DNA 首先提基因组，有突变的基因，也有未突变的第二，利用基因组进行PCR,得到突变的带型和未突变的野生型带型第三，在将PCR产物进行变性，再复性，变性，再复性........几个循环后，就可以得到野生型和突变型的杂交带，杂交带中含有错配的碱基第四，再用T7 核酸内切酶 I 作用，识别错配碱基进行切割。