• 游客
收藏 | 举报 2008-06-16 09:06   关注:260   回答:5

【求助】请问,用T4连接酶连接以后,做转化时,还需要酒精沉淀...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-05 03:01
【求助】请问,用T4连接酶连接以后,做转化时,还需要酒精沉淀吗?

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  • 游客
举报 2008-06-25 15:40
我一般都是连接后直接用反应溶液进行转化的。

转化大肠杆菌时只要有50ng质粒转入细菌即可完成成功克隆,因而不必为此再次纯化。乙醇沉淀后反而损失很大,不一定能保证转化结果了。
  • 游客
举报 2008-06-17 12:26
直接转化就行了。
  • 游客
举报 2008-06-27 16:06
如果是电转化,就必须纯化;如果是化学转化,无需纯化。
  • 游客
举报 2008-06-27 11:12
我电转放2ul也不需要纯化,如果再多就需要了,否则会有电火花
  • 游客
举报 2008-06-24 08:16
粘性末端补平以后,要做连接,还需要纯化吗?可不可以直接用补平的反应液来做连接哪?