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【求助】请问,用T4连接酶连接以后,做转化时,还需要酒精沉淀... 已解决
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【求助】请问,用T4连接酶连接以后,做转化时,还需要酒精沉淀吗?
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2008-06-25 15:40
我一般都是连接后直接用反应溶液进行转化的。
转化大肠杆菌时只要有50ng质粒转入细菌即可完成成功克隆,因而不必为此再次纯化。乙醇沉淀后反而损失很大,不一定能保证转化结果了。 |
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2008-06-17 12:26
直接转化就行了。
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2008-06-27 16:06
如果是电转化,就必须纯化;如果是化学转化,无需纯化。
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2008-06-27 11:12
我电转放2ul也不需要纯化,如果再多就需要了,否则会有电火花
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2008-06-24 08:16
粘性末端补平以后,要做连接,还需要纯化吗?可不可以直接用补平的反应液来做连接哪?
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