• 游客
收藏 | 举报 2017-11-27 06:38   关注:212   回答:1

RNA提取后有必要用DNA酶处理吗...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-14 03:53
RNA提取后有必要用DNA酶处理吗

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  • 游客
举报 2017-11-29 06:22
RNA提取后有没有必要用DNA酶处理主要和你的用途有关。如果仅仅是扩某个基因,那就无所谓。如果是定量RT-PCR,则最好DNA酶处理一下,或者引物需跨exon.
比如用QIAGEN的RNase-free的DNase处理的,不是加了DNase就结束了,为了去除DNase(蛋白)和buffer等可能影响到后期操作的因素,所以酶解了DNA后必须纯化RNA(QIAGEN的纯化柱),这样得到的RNA才用于定量实验。即使这样,在做real-time PCR时都要加一管仅加RNA的作为阴性对照(排除DNA的污染)。