• 游客
收藏 | 举报 2009-03-16 21:45   关注:220   回答:10

【求助】PCR中的DNA聚合酶和载体的选择问题,希望大家帮忙...

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【求助】PCR中的DNA聚合酶和载体的选择问题,希望大家帮忙

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  • 游客
举报 2009-03-23 07:20
用Pfu高保真酶扩增!载体选择PcDNA3.1
  • 游客
举报 2009-03-25 15:30
谢谢,你的帮忙,我十分感谢,不过我稍微查了一下你说的载体,好像是5000多,我们老师不会给我买的,能给我推荐一个便宜一些的吗,300、500的,十分感谢,无限感激
  • 游客
举报 2009-03-20 04:55
希望大家帮忙啊!!!
我的平端载体应该选哪个啊
  • 游客
举报 2009-03-24 14:45
我们有top克隆平端载体,需要请联系我
  • 游客
举报 2009-03-26 01:18
如果有条件最好用 PrimeSTAR GXL
如果没有那个条件可以用Prime STAR HS
如果GC含量高可以用Prime STAR HS with GC buffer
  • 游客
举报 2009-03-25 11:53
Prime STAR HS with GC buffer

真的很好用吗,我正在考虑呢
  • 游客
举报 2009-03-17 02:27
如果从费用角度来考虑 LA taq with GC buffer 是非常好的。一般做5‘RACE我都用这个,LA Taq配GC buffer I 基本无敌,但是有的时候会有个别碱基错配。prime STAR的扩增效率能低一点,保真效果好,这个看实际情况决定。
  • 游客
举报 2009-03-21 06:13
谢谢楼上的朋友,我的基因要去测序,要有保真性,呵呵,我想问问这prime STAR对于引物有没有要求啊,要求引物磷酸化吗??

期待回来。。。。。。。。。。。。。。。。。。
  • 游客
举报 2009-03-24 01:29
引物没有特殊要求,一般的PCR级别引物就可以。以下是说明书:
http://www.takara.com.cn/explain/E/DR010A.pdf
http://www.takara.com.cn/explain/E/DR044A.pdf
需要注意的是这个酶是HS版本的,在PCR程序设定时最好在前面先加一步94度3分,这个说明书上没有提到,本人一般使用其中的2 step PCR反应条件。
  • 游客
举报 2009-03-27 08:21
楼上的jk_xdx
十分感谢你的提醒,要不然我要走很多的弯路呢,好人好梦呵呵