真核生物的dna聚合酶需要镁离子，这和它的结构有什么具体关系..._DNA聚合酶_核酸酶类_分子类_知道

全部问答分类

游客	收藏 \| 举报 2017-11-27 06:37 关注：207 回答：1 真核生物的dna聚合酶需要镁离子，这和它的结构有什么具体关系... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-11-16 04:35 真核生物的dna聚合酶需要镁离子，这和它的结构有什么具体关系

游客

举报 2017-11-30 00:29

TaqDNA聚合酶是Mg2+依赖性酶，该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感。以活性程度很低的鲑鱼精子DNA为模板，dNTP的浓度为0.7～0.8mmol/L时，用不同浓度Mg2+进行PCR反应10min，测定结果为Mgcl2浓度在2.0mmol/L时该酶催化活性最高，此浓度能最大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性，Mg2+过高就抑制酶活性，当Mgcl2浓度在10mmol/L时可抑制40～50%的酶活性。由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离的Mg2+浓度，因而Mgcl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整，优化浓度。一般反应中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5～1.0mmol/L。适当浓度的KCl能使Taq DNA聚合酶的催化活性提高50～60%，其最适浓度为50mmol/L，高于75mmol/L时明显抑制该酶的活性。