• 游客
收藏 | 举报 2008-04-24 22:54   关注:262   回答:6

【求助】细胞裂解液加多少量?...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-23 23:45
【求助】细胞裂解液加多少量?

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  • 游客
举报 2008-05-03 01:03
【1】哈,可以把裂解液用量调整为50-100微升。

【2】加入裂解液后可以加用超声破碎细胞。

【3】提完细胞的器具可以在显微镜下看一下,剩余的细胞还多不多。如果还多,说明细胞提取的不彻底,还要改进方法,争取提取的细胞彻底一些。
  • 游客
举报 2008-04-29 03:13
一般推荐量是10cm dish/500ul.其他体系根据培养细胞表面积类推.
如果细胞特殊,则量还需更改.
  • 游客
举报 2008-04-30 09:11
加入裂解液时一般每10^6个细胞加入0.1 ml裂解液。是如果此条件下最终提取物蛋白浓度应该不低于5mg/L。
一般情况下,可参考下述的使用条件,但细胞数目会因细胞的大小而变动,对于特别大或特别小的细胞,需要自行计数,摸定条件。
6孔板的单孔(1~2×10^6细胞),加入0.1~0.2 ml;25 cm^2培养瓶(3~6×10^6细胞),加入0.3~0.6 ml;75 cm^2培养瓶(1~2×10^7细胞),加1~2 ml。
  • 游客
举报 2008-05-04 22:33
1、我的培养瓶是25 的,每次用200μg的细胞裂解液,蛋白很浓
2、建议用细胞刮刀,冰上裂解
  • 游客
举报 2008-04-26 22:32
谢谢大家的帮助!
  • 游客
举报 2008-04-25 07:21
灰常感激撸主