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求教：免疫组化DAB显色底色淡是什么原因... 已解决
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- 解决时间 2024-11-21 20:04
求教：免疫组化DAB显色底色淡是什么原因
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2017-10-05 03:31
1）抗体浓度高：抗浓度高见原解决办每使用新抗体前应其工作浓度进行测试使每抗体体化找适合自实验室理想工作浓度既使即用型抗体应能简单按说明书进行染色 （2）抗体孵育间或温度较高：解决办严格执行操作规程随身佩带报表或报钟及提醒避免遗忘造间延现流行二步（Polymer）敏性高要求抗孵育间传统130钟要根据染色结进行调整 （3）DAB变质显色间太：DAB现用现配沉渣应进行滤再用配制DAB应存放间太没酶情况氧化氢游离氧原与DAB产反应降低DAB效力未用完DAB存放冰箱几再用种似乎节约办取DAB显色显微镜监控达理想染色程度立即终止反应染色片太或用染色机做似乎现实至少应些新或少用抗体显色进行监控避免显色间 （4）组织变干：修复液溢未及补充液体、染色切片太、作太慢、忘记滴液、滴液流失等都造组织变干原解决办操作要认真仔细采用DAKO笔或PAP Pen组织周围画圈效避免液体流失能提高操作速度 （5）切片缓冲液或修复液浸泡间太（于24）：原清楚现象存实验室喜欢前切片脱蜡至修复第二加抗体进行免疫组化染色装切片修复液容器放4ºC冰箱夜结明显影响放室温特别炎热夏现背景着色存放间太 （6）抗变质、质量差克隆抗体：注意抗体效期期抗体要麽显色要麽背景着色用新买抗体设立阳性照用使用抗体作比展开
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