重组蛋白的组氨酸标签怎么去掉..._其它重组蛋白_重组蛋白_蛋白类_知道

全部问答分类

游客	收藏 \| 举报 2018-01-24 18:52 关注：235 回答：3 重组蛋白的组氨酸标签怎么去掉... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-22 09:43 重组蛋白的组氨酸标签怎么去掉

游客	举报 2018-02-05 01:55 6xHis标签可用一些酶，譬如TAGZyme去除

游客

举报 2018-02-02 21:38

PET-32a的His tag分别在前面的trx蛋白C端以及你的目标蛋白C端，如果你的目的蛋白在构建载体的时候自己加了终止子，那么你的目的蛋白C端是没有His tag的，也就是说唯一一个his tag在trx与你的蛋白之间（PET32a是融合蛋白），这样，PET-32a提供的两个肽链内切酶（凝血酶和肠激酶）都是可以切掉的，当然，个人建议你用肠激酶，因为肠激酶酶切位点更贴近你的目的蛋白，而用凝血酶的话还有一个S tag。如果你在构建载体的时候，下游引物没有加终止子，那么你的蛋白的N端也会有一个His Tag，这时候你需要用TAGZyme了，这个酶专一性去除his tag的。