• 游客
收藏 | 举报 2017-04-10 20:50   关注:224   回答:5

求助稀释好的一抗和二抗一般最多能重复使用几次...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-16 22:31
求助稀释好的一抗和二抗一般最多能重复使用几次

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  • 游客
举报 2017-04-11 14:20

跟变黑没直接关系,主要是重复久了,抗体效价会下降,识别目的条带能力降低。

具体能重复几次,跟抗体本身,还有你自己的实验条件有很大关系。每个实验室都不一样的(重复三四次的我试过,但也有的使用过一次就不好用了)。

你自己动手摸索下就行了。

  • 游客
举报 2017-04-11 14:31

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janlont

跟变黑没直接关系,主要是重复久了,抗体效价会下降,识别目的条带能力降低。

具体能重复几次,跟抗体本身,还有你自己的实验条件有很大关系。每个实验室都不一样的(重复三四次的我试过,但也有的使用过一次就不好用了)。

你自己动手摸索下就行了。

......

好的 谢谢

还有个问题想请教一下,封闭的原理究竟是什么?为什么要封闭?背景黑与封闭有关吗

  • 游客
举报 2017-04-16 21:08
一般我都是重复用三次,abcam的抗体,效果不错!
  • 游客
举报 2017-04-17 10:47

一抗重复 看你上次效果。二抗每次新配。一抗重复多了 会有黑点,脏。 封闭就是对膜上没有蛋白的地方填满,防止抗体的非特异性结合。

  • 游客
举报 2017-04-19 15:52
real456

一抗重复 看你上次效果。二抗每次新配。一抗重复多了 会有黑点,脏。 封闭就是对膜上没有蛋白的地方填满,防止抗体的非特异性结合。

谢谢 二抗都至少重复用了5次