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【专题讨论】蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持，尽管问：... 已解决
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【专题讨论】蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持，尽管问：）[精华]
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2009-06-11 22:03
展开引用 1234567_zhh ...... 1.控制好温度，超声破碎应该没问题．２．需要镍NTA琼脂糖凝胶或别的Ni-NTA填料及柱子或直接买预装柱,详细使用见www.wsac.cn 资料下载下的镍NTA琼脂糖凝胶FF说明书.3.最好查资料,如果不清楚可先用试试.4.最好别选钴的,作用力太弱.要多少不清楚,因为和你表达量有关,一毫升填料可上5-10mg目标蛋白,所以可自己计算.5,没问题. |
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2009-06-08 07:53
展开引用 海上的1900 ...... 应该可以,只要你填料孔径是300埃的适合蛋白分析的就可以,最好问公司技术人员. |
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2009-06-15 14:29
chromatography兄您好：
今天做了个实验出现个现象我不太明白，麻烦你帮我分析一下： 一个蛋白用ni-柱亲和层析纯化，平衡缓冲液位20mMpb，ph8.0，0.5m NACL,1mM DTT,可是刚开始平衡时ni柱就变成棕色的了，怀疑是DTT的原因，以前做过此实验，没有加DTT,没有出现过类似现象，DTT对ni柱有什么影响啊？ |
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2009-06-04 13:52
展开引用 xingtingting ...... 对,被还原了,可改用ni-NTA填料或别加DTT. |
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2009-06-13 20:08
chromatography 老师：
您好，我有几个问题想请教您，就是我看到GE公司resource S和Q预装柱的说明书，有“阴离子柱应避免使用阴离子型去垢剂，阳离子柱应避免使用阳离子型去垢剂”，不知道如果使用了会对柱子有什么损害？还有就是我现在在纯化一种蛋白，但是要用到一种“兼性去垢剂”，不知道能不能带着它上resource S和Q柱呢？ 谢谢！ |
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2009-06-14 05:45
展开引用 zxdlilon ...... 我觉得你可试试,通常去垢剂对离子柱子没什么损害,要不你可问他们的工程师. |
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2009-06-12 03:00
chromatography兄您好：
我想问您一下羟基磷灰石这种介质应该如何溶胀啊 ？ |
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2009-06-15 05:15
xingtingting 这填料有好几钟,不同厂家不一样,你最好是看说明书,干粉的通常直接泡过夜,如果是液体保存的就不需要溶胀,装柱用即可. |
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2009-06-06 09:49
请问楼主，我要用COIP的方法纯化细胞系中的蛋白质，所用抗体的量和浓度是多少？多谢！
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2009-06-06 00:16
wujinzi 你最好是查文献或实验书,我没做过. |
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