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求助……western条带不均匀…... 已解决
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- 解决时间 2024-12-22 10:27
求助……western条带不均匀…
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2016-12-20 23:54
展开引用 icy_fan |
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2016-12-26 20:27
展开引用 icy_fan |
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2016-12-21 07:38
这个是上次跑的目的的条带，都是这样成块状的，而且也是条带不均匀…跑了两三次了还是这样求指导…
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2016-12-23 06:33
又做了一次内参 还是这样……
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2016-12-26 23:58
可能原因： 1，胶凝得不好 2，胶在转膜夹中被挤压变形 3，电泳电压太高，胶发热变形 |
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2016-12-18 02:32
展开引用 China13113 ...... 谢谢解答！请问胶凝得不好需要怎么调整呢…电泳电压是100V不过实验室电压不稳经常调到A，像图片这样，电泳完了电泳液是热的。另外条带跑成这样会和样本蛋白不好有关吗？ |
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2016-12-25 10:10
第一次跑的时候反而还好一些，越往后条带越不好了，这是第一次的内参条带
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2016-12-19 19:00
胶的问题可以在论坛里搜下，有很多很好的分享。 是否用的使回收的抗体，可以新配再试。 样本不好也会影响条带，重新提蛋白。或用别人跑得好的样本试试，找原因。 |
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2016-12-17 14:07
展开引用 China13113 ...... 抗体都是用的新配的蛋白在煮沸之前在常温搁置了半个小时的样子，不知道有没有影响诶 |
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2016-12-20 11:37
icy_fan PMSF的有效时间大概就一个小时，还是尽快处理，减少酶对蛋白的影响。 |
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