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2016-06-02 05:01
求助!先自己顶。
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2016-06-06 07:01
脱水的时间你是参考的文献还是自己摸索的?个人觉得脱水不够。我处理脑片脱水是70%过夜,80%,90%各两个小时,95%,100%各一个小时,切片厚度是5μm,没有脱过片。脱水时间够不够可以通过透明的程度来反应,组织透明效果不好的很大原因是脱水不够 |
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2016-06-04 10:53
展开引用 Justin001 ...... 透明的时候大约50min能够完全透明,从酒精进入二甲苯的时候组织周围不起雾,没有白色的出现。 |
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2016-06-06 18:36
展开引用 Justin001 ...... 求助老师,通常透明时间是多久?组织完全透明是已经透明过度了么? |
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2016-06-03 00:57
展开引用 yan1091038778Justin001 ...... 我用的脱水时间就是上面说的,透明我就用的二甲苯共45分钟(分两次),量要够。 |
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2016-06-09 16:49
展开引用 Justin001yan1091038778Justin001 ...... 您做的是大鼠吗?我脱水时间是参照《实验病理学技术图鉴》这本书,您的脱水时间和上面大鼠的脱水时间差不多。透明时间书上面大鼠加起来是2h,小鼠是8min。您做好透明后组织是全通透的还是按照时间做完后就取出组织?我的脱片原因会不会是透明时间过久? |
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2016-06-09 10:05
展开引用 yan1091038778Justin001yan1091038778Justin001 ...... 小鼠的脑脱水我用的这个时间。8分钟是完全没可能把小鼠脑的水脱干净的,水没脱好,二甲苯也就进不了组织,浸蜡的时候蜡也进不了组织,没有蜡支撑组织切片也就切不出来。透明的这个时间我是摸索了一段时间的,效果不错就确定的45分钟 |
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2016-06-05 19:57
展开引用 Justin001yan1091038778Justin001yan1091038778Justin001 ...... 多谢老师指导,另外问老师两个关于细节方面的处理。一是固定好的组织要用流水冲洗很长一段时间吗(之前做是用pbs冲了一下)?二是烤片之后要冷却至室温再进行脱蜡吗(之前是从60℃烘箱拿出来装在染色架上后接着就脱蜡)?上面两个细节处理不好会是导致图上问题的原因吗 |
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2016-06-06 13:36
展开引用 yan1091038778Justin001yan1091038778Justin001yan1091038778Justin001 ...... 我的话是固定后用PBS冲洗了几次,主要是去除表面过多的固定液,再用吸水纸稍微吸一下。我是每次烤完片冷却了放一段时间再脱蜡,刚烤片,片子还没有贴上去,马上脱蜡是会容易脱片。担心脱不干净可以冷却一段时间后再放温箱的烤几分钟再去脱蜡 |
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2016-06-03 20:10
展开引用 Justin001yan1091038778Justin001yan1091038778Justin001yan1091038778Justin001 ...... 再次谢过!追问一下,浸蜡采用先低熔点30min再高熔点40min有没有问题?您浸蜡采用的材料、方法和时间是怎样的? |
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