• 游客
收藏 | 举报 2010-09-15 21:45   关注:222   回答:8

【求助】超声破碎仪提取总RNA和基因组DNA...

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【求助】超声破碎仪提取总RNA和基因组DNA

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  • 游客
举报 2010-09-15 21:58
顶起!盼高人解答。谢谢!
  • 游客
举报 2010-09-19 04:45
能!我和同学提取肝脏组织的蛋白和RNA都是用的超声细胞破碎仪,注意放在冰上操作,组织粉碎即可,具体电压不记得了。
用酒精棉球擦拭,再用无菌棉片檫干消毒后,再放入trizol中超声破碎,然后按提取步骤操作就行了。
提取出来的RNA沉淀还是很多的,后续的结果也可以,可以试试。
  • 游客
举报 2010-09-21 00:12
请问电压 和 时间?
  • 游客
举报 2010-09-25 19:43
不推荐使用,确实存在问题
1:会把RNA和DNA打断。2:超声破碎过程中会产热,会降解RNA。
如果构建cDNA文库一定不要使用,但是普通的rt可以使用
肝脏的酶活性很强,推荐使用液氮研磨
  • 游客
举报 2010-09-19 07:48
谢谢楼上各位的回复!
  • 游客
举报 2010-09-21 19:19
也没有什么电压和时间吧,那个东西,打的时间长一点点,头就特别的热,所以一般都是在磨的过程中备一瓶带冰的NS,一般都是十五秒一停,然后就放入带冰的NS中降一下温,电压好像总有两三档来着,能打碎就OK。如果是DNA还行,RNA还是像楼上推荐的液氮研磨。
  • 游客
举报 2010-09-19 13:47
songtion
不推荐使用,确实存在问题
1:会把RNA和DNA打断。2:超声破碎过程中会产热,会降解RNA。
如果构建cDNA文库一定不要使用,但是普通的rt可以使用
肝脏的酶活性很强,推荐使用液氮研磨

如果是培养的肝细胞可以用液氮研磨吗,因为加trizol之后感觉裂解不完全,如果加了trizol怎么用液氮研磨呢?
  • 游客
举报 2010-09-17 21:53
我用超声破碎血块最后pcrp出来了