• 游客
收藏 | 举报 2016-04-15 14:13   关注:315   回答:7

求助如何避免提动物组织蛋白质研磨过程中起泡...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-22 12:09
求助如何避免提动物组织蛋白质研磨过程中起泡

我来回答
  • 游客
举报 2016-04-22 10:54

再次加入少量的PMSF泡泡会少很多

  • 游客
举报 2016-04-20 02:41

我想问一下 你用这个电动研磨器不会产热比较多吗 效果可以吗 我也想提组织蛋白 不敢用电动组织研磨器呢

  • 游客
举报 2016-04-23 13:33

@早孕有反应早孕兄弟你好,我觉得你担心的很有道理,怕是电动研磨器在研磨的过程中产热,影响蛋白。

  • 游客
举报 2016-04-23 19:13

之前用过钢珠的研磨仪,时间很快的,一般1-2min吧,所以产热也不会很多啊,我们用之前还把固定EP管的器材提前放进-80℃冻了一下下,就几分钟,不敢冻太久,反正磨好了没什么温度,起泡的,没管,打磨过程必然会起泡吧,静置之后,选了一些没磨好的继续磨,然后就把打磨液吸出来就算好了。

  • 游客
举报 2016-04-16 23:38
早孕有反应

我想问一下 你用这个电动研磨器不会产热比较多吗 效果可以吗 我也想提组织蛋白 不敢用电动组织研磨器呢

还可以,能提出蛋白的

  • 游客
举报 2016-04-18 09:41

展开引用

claire樱奈

动物组织块冻存在液氮,取出后放到1.5mlEP管中,EP管中加入RIPA裂解液(按照0.1mg组织最多1ml裂解液的体积使用,用前已加入PMSF),使用电动组织研磨器研磨,每次研磨时间10秒左右,研磨过程中发现蛋白质起泡,就像做蛋糕时鸡蛋被打出泡一样。请问如何避免这种情况?

PS,本来试着在冰上操作,但是电动组织研磨器工作时EP管震动的很厉害,没法放在冰上。


......


前辈您好,我也刚准备组织提蛋白,用正常组织预实验出现类似您提到过的情况,最后您怎么处理呢?
  • 游客
举报 2016-04-19 21:59
朗朗健康

前辈您好,我也刚准备组织提蛋白,用正常组织预实验出现类似您提到过的情况,最后您怎么处理呢?

同问~你们提取组织蛋白的时候是直接加裂解液然后匀浆 离心 抽上清么?有没有超声之类的步骤啊?