流式细胞仪测细胞周期图怎样分析..._流式细胞仪_计数测量_仪器类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2017-10-05 01:01 关注：160 回答：1 流式细胞仪测细胞周期图怎样分析... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-22 22:59 流式细胞仪测细胞周期图怎样分析

游客

举报 2017-10-16 12:39

（1）细胞培养
取对数生长期的细胞，按1X106个/mL以1mL体积接种于6孔板内。培养24h后，加入不同浓度样品。在37 ℃、5 % 的CO2恒温箱中培养24h后终止。
（2）细胞固定
胰酶消化并离心收集细胞（800rpm/min），弃上清，用预冷PBS洗细胞两次，加入预冷70％乙醇， -20℃固定保存。
（3）细胞染色
离心收集细胞（800rpm/min），以1mL的PBS洗细胞一次，加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭（PI），100ug/mL RNase A, 4℃避光孵育20分钟。
（4）检测
以标准程序用流式细胞仪检测，汞激发波长488nm，计数8千个细胞，结果用软件WinMDI Version 2.9分析。