• 游客
收藏 | 举报 2003-10-31 15:33   关注:206   回答:11

请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆?...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-04 02:59
请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆?

我来回答
  • 游客
举报 2003-11-12 00:23
再详细一点吧,否则很难帮到你的!我的专业里BMP2指骨形态发生蛋白2,再说了抗凋亡基因的knockdown效应应该是凋亡呀,做梯度转染观察凋亡就可以了,筛稳定克隆做什么?非要做的话,就用诱导型RNAi表达载体,可以在诱导前筛稳定克隆。
  • 游客
举报 2003-11-09 02:54
多谢liven老师!

其实我不做BMP2,文献上说它是TGF-B超家族的成员之一,与细胞凋亡有关。
筛选稳定克隆我想看看它与其它基因或蛋白的关系。
请问什么是诱导型RNAi表达载体?
谢谢!
  • 游客
举报 2003-11-03 20:35
好像现在有Tet On型的RNAi载体,用GOOGLE查查看!
  • 游客
举报 2003-11-05 06:49
sunyy1976
我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。
昨天看了一篇文章,用antisense阻断BMP2(具有抑制凋亡的作用)的表达,不能筛选出稳定转然的克隆,因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫,请各位老师帮忙!

谢谢!

能否提供该文,学习学习!!
  • 游客
举报 2003-11-01 09:53
我不会上传文章,就先发送到victoh的信箱。
不好意思,我写得有错误,不是用的antsense,是转染的点突变的BMP2的质粒。
  • 游客
举报 2003-11-07 18:49
收到了,谢谢!
可以帮你上传吗?
  • 游客
举报 2003-11-11 20:45
可以,谢谢!
liven老师,我听说tet挺难做的,我想问一下哪个公司的siRNA 表达载体比较好用,转染哺乳动物细胞的。谢谢!
  • 游客
举报 2003-11-06 20:20
sunyy1976
可以,谢谢!


BMP1B apoptosis.part1.rar(390.63k)
  • 游客
举报 2003-11-06 19:34
2Pt2

BMP1B apoptosis.part2.rar(296.63k)
  • 游客
举报 2003-11-08 18:27
Tet on 的Pol III的表达载体出现于2000年的human gene therapy,去年又出现了几篇文献,难道大家都没有注意吗?使用PolII启动子可以达到组织特异性,已经有文献报道使用Pol II启动子引导siRNA表达获得了满意的结果 。
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