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2017-11-13 01:19
RNA病毒感染性克隆技术是利用病毒感染性cDNA克隆研究RNA病毒结构与功能的一项新技术,包括病毒基因组全长cDNA克隆构建和病毒RNA的感染性转录体制备及导入。该技术的发展实现了对RNA病毒在分子水平上的操作,为RNA病毒基因组的结构和功能研究提供了有效的方法。
1981年,Racaniello和Baltimore将包含脊髓灰质炎病毒全长cDNA的质粒DNA转染宿主细胞,成功地构建了首个RNA病毒的全长cDNA克隆。获得cDNA感染性克隆后,可以在DNA水平上通过突变、插入、缺失和互补等手段研究RNA病毒的基因复制、表达、重组及RNA病毒与宿主的相互作用等。目前,该技术得到了广泛发展和应用,许多RNA病毒的感染性克隆已获得,并已非常广泛地应用于RNA病毒结构功能、致病机制的研究及载体与疫苗研发等。 |
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2017-11-16 14:32
一种制备DNA的多步骤方法,其中将一种下列DNA克隆入细菌人工染色体(BAC)中: (a)包含全长拷贝RNA病毒基因组RNA(gRNA)的DNA;或者 (b)包含RNA病毒的一个或多个gRNA片段的DNA,所述片段编码RNA依赖性RNA聚合酶和至少一种结构蛋白或非结构蛋白;或者 (c)与(a)或(b)序列的同源性至少为60%的DNA。
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