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【求助】用QuikChange试剂盒做单点突变，测序后没有突... 已解决
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- 解决时间 2024-12-22 18:14
【求助】用QuikChange试剂盒做单点突变，测序后没有突变
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2013-04-09 10:46
GC含量高，体系里加4%-8%的DMSO
延伸时间尽可能缩短，最多16-20个循环。PCR后DpnI消化一小时后震荡混匀，离心后再消化一小时 如果实在有困难，连T载体应该会容易很多 |
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2013-04-17 22:03
laforet好的，谢谢前辈啦，我先试试看加DMSO，再把片段切到t载体上试试~~ |
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2013-04-20 08:00
请问，实验结果怎么样了？？？我也在用这种方法，测序显示都没有突变，求指教？？
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2013-04-13 16:38
yunlongma我用了小一些的质粒就做出来了···· 如果还是做不出来那就修改一下反应时间温度循环的条件。 这个试剂盒比较贵，所以在摸条件的时候不用按照说明书上的体积，只要比例对就行！ |
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