怎样根据sirna确定其特异性..._寡聚核酸_其他分子产品_分子类_知道

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游客	收藏 \| 举报 2017-09-29 11:16 关注：121 回答：1 怎样根据sirna确定其特异性... 已解决悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-23 02:08 怎样根据sirna确定其特异性

游客

举报 2017-09-29 15:44

1，mRNA 水平的检测：siRNA 的作用机理在于其引起靶 mRNA 的降解，因此 mRNA 的降解水平是 siRNA 沉默效率的最直接指标。一般在 siRNA 转染后 24~72h 即可以检测到靶 mRNA 水平的降低。检测方法一般采用 Real-time PCR 定量检测。2，蛋白水平的检测：一般需要借助抗体(针对靶基因蛋白质的抗体或针对融合蛋白的抗体)或报告基因系统检测，检测手段一般有 Western-blot、免疫组化等。一般说来，检测时间受细胞内蛋白质表达量、蛋白质本身的半衰期等因素的影响，一般为 48~96h，甚至更长时间之后多点采样。3，通过siRNA引起的其他生物学变化来检测：某些siRNA作用于靶基因，会引起细胞的调亡和增殖变化，这个时候，可以通过关于调亡和增殖的变化来看RNAi的效果。希望能对您的问题有所帮助。