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【求助】关于全长cDNA文库构建的须知及难点... 已解决
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【求助】关于全长cDNA文库构建的须知及难点
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2008-04-08 06:37
你建库是偏重全长还是多拿克隆呢？
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2008-04-09 12:12
构建测序文库一般用clontech smart试剂盒，表达文库一般用strategene的试剂盒。生手建库会比较费劲，要有思想准备。找公司帮助构建或许是个不错的选择，省时省力，花费也不会很多。需要这方面的实验服务，可以与我联系。
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2008-04-08 17:51
谢谢指教:)
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2008-04-08 05:22
我是新手，从没做过分子试验也担心做不好
现在RNA提取还没过关呢，真是急人啊！ |
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2008-04-09 01:29
RNA的提取关键就是避免降解的问题。苔藓的RNA提取，你使用的是什么试剂盒呀？
实验室的环境、操作时要戴手套口罩等、所使用的器皿都要注意避免RNase的污染。 从新鲜材料中获得RNA后，最好立刻做反转录和合成双链，这样获得双链cDNA后，就安全多了。然后纯化的过程也要注意，免得损失过多，也会对后续实验造成不良后果。 |
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2008-04-07 08:51
还要看看合格全长CDNA文库质量标准
库容 插入子长度 文库全长率 冗余度 重组率 |
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2008-04-14 02:41
目前没有很好的全长文库构建试剂盒的，SMART方法缺点多多，不建议使用，可以使用高碘酸钠氧化法，不过自己做需要长时间的经验积累，不好做的，建议找公司做，上海海科生物就做的蛮好的，我在那里做过几个。价格也不贵。
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2008-04-11 05:17
你好，朋友。我在构建cDNA文库，遇到很大麻烦。请问可否告知邮箱，我可以具体咨询一下你吗？感激不尽了。 |
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