raybiotech ELISA试剂盒怎么样..._刺激/抑制试剂_细胞培养_细胞相关_知道

1
　　、
　　Cell-Based ELISA
　　的优点：
　　Cell-Based ELISA
　　（基于细胞的
　　ELISA
　　）是一种全新的
　　ELISA
　　技术，有两个最突出的优点：
　　1.1
　　不需要抽提蛋白、包被微孔板：细胞直接在微孔板里培养，待检测的时候，将细胞固定在微孔板上并
　　进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时，由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
　　程度上偏离了实际情况。
　　同时不用包被微孔板，
　　简化了实验流程，
　　有助于提高效率。
　　科研人员在一个
　　96
　　孔
　　酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样
　　本的损失也能降到最低，比起其他普通的
　　ELISA
　　测定方法，这项全新的
　　ELISA
　　技术能更快速、更方便
　　地一次检测大量的细胞内蛋白。
　　1.2
　　可同时检测两种不同蛋白：
　　封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗，
　　然后再加入不同的
　　二抗，加入两种荧光底物，检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的，可以减少工作量，此
　　外还可以满足一些特殊的实验需要，例如，需要测定某个蛋白的磷酸化比例，就需要测定磷酸化蛋白的数
　　量和总蛋白的数量，这两个测定在同一次实验进行，有助于消除实验误差，得到更为精确的实验结果。
　　2
　　、
　　Cell-Based ELISA
　　的两种技术：
　　某些公司发展了双通道
　　Cell-Based ELISA
　　技术；
　　双通道与单通道
　　Cell-based ELISA
　　比较：
　　双通道
　　cell-based ELISA
　　，顾名思义，即一次可以同时检测两种目的蛋白，
　　R&D Systems
　　提供的
　　Cell-based ELISA
　　就是双通道
　　cell-based ELISA
　　，原理略：（需要荧光检测方式和相应仪器）；
　　单通道
　　cell-based ELISA
　　，即一次只能检测一种目的蛋白，他和普通
　　ELISA
　　的主要区别在于样品处理过
　　程
　　3
　　、
　　cell-based ELISA
　　的应用：
　　该产品，最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量；
　　4
　　、有
　　cell-based ELISA
　　产品的公司：目前，多家
　　elisa
　　产品提供
　　商均
　　提供
　　cell
　　based
　　elisa
　　试剂盒，
　　如
　　Rnd
　　systems
　　，
　　raybiotech
　　，
　　ebioscience
　　，
　　millipore
　　等公司；
　　5
　　、如何自己进行
　　cell based elisa
　　实验？
　　事实上，根据单通道的
　　cell based elisa
　　原理，可以自己建立
　　cell based elisa
　　实验系统；
　　细胞加入培养板中；
　　加入刺激物或者抑制剂进行培养；
　　对细胞进行固定或者封闭；
　　加入第一抗体；
　　加入
　　HRP
　　结合的二抗（二抗的选择，同
　　western blot
　　）；
　　加入底物进行显色；

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