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2017-10-08 23:15
这个问题由武汉新启迪生物来为您解答。
做ELISA实验,在处理样本前应该先了解收集样本的注意事项。 【标本收集注意事项】 1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。 2.血清和血浆避免使用溶血,高血脂标本。 3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 4.标本收集后若不及时检测,需按一次使用量分装,冻存于-20℃,-80℃电冰箱内,避免反复冻融。 5.可根据标本的实际情况,做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。 6.收集标本,尽量做到双份的用量,避免一次实验失败,重复实验时标本缺失,从而耽误实验进程。 7.收集标本时,应该做好防护措施(比如戴手套,口罩,护目镜等),认为所有标本都具有一定的潜在危险性。 8.样本处理应该在生物安全柜里面,并且正确使用生物安全柜。 样本正确的处理方法应该是这样的: 【标本处理办法】 1.血清:将采集的全血静置冰箱4℃过夜,然后1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。 2.血浆:用EDTA,枸橼酸钠,肝素等作为抗凝剂,加入血液混匀后,1000-3000rpm离 心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月) 保存。 3.组织匀浆:切取组织块,0.01MPBS中过洗一次;按照1G组织加入5-10ml组织蛋白萃取试剂的比例,在冰水中匀浆。匀浆完成后,5000-10000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。 4.细胞培养上清:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。 5.尿液,腹水,脑脊液等:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃3-6个月)保存。 注:样品稀释的一般原则 用户须查阅相关文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。 希望可以给您提供帮助,祝您科研顺利! |
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