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  • 游客
收藏 | 举报 2017-06-23 13:14   关注：230   回答：10

求助 固体培养基上的菌落，无法用液体培养基扩增...

已解决 悬赏分：0 - 解决时间 2024-12-22 01:12
求助 固体培养基上的菌落，无法用液体培养基扩增

我来回答
  • 游客
举报 2017-06-30 20:39
质粒有没有导入感受态细胞？
  • 游客
举报 2017-06-27 09:45
你直接用质粒在固体培养基培养的？你有没有进行连接转化？
  • 游客
举报 2017-06-24 15:27
固体琼脂板氨苄的问题。氨苄高温会失效
  • 游客
举报 2017-07-03 09:45

展开引用

寻影


大家好，我是一个质粒小菜鸟，最近遇到个奇怪的事情，希望大家帮忙看看，究竟出了什么问题。

我构建了一个氨苄抗性的质粒，这个质粒在固体培养基里长出了单菌落，但是我挑菌在液体培养基里无法扩增出来。固体培养基和液体培养基一起配置的，氨苄浓度一致，唯一不同的是固体培养基里加入了琼脂。为了防止是氨苄的问题，我把这个固体培养基上的菌落挑划了新的板，依然能长出菌落。而同一次配置的液体培养基，也能扩增其他质粒，所以我实在想不出是什么其他问题，希望大家帮帮忙。



......


平板怎么倒的？配置好高压后，等冷却再加抗生素？还是高压前加的？
  • 游客
举报 2017-07-01 11:04
dxy_mc067er5
质粒有没有导入感受态细胞？

这个是用氨苄筛选，长出来应该就是导入了(>﹏<)
  • 游客
举报 2017-07-03 18:01
dxy_mc067er5
你直接用质粒在固体培养基培养的？你有没有进行连接转化？

进行连接转化了呀，DH5菌
  • 游客
举报 2017-07-01 19:34
念123
固体琼脂板氨苄的问题。氨苄高温会失效

可是，作对照的那个板上一个菌都没有(>﹏<)
  • 游客
举报 2017-06-25 14:00
寻影

可是，作对照的那个板上一个菌都没有(>﹏<)

进行酶切验证
  • 游客
举报 2017-07-01 04:03
dxy_mc067er5

进行酶切验证

可是无法用液体培养基扩增呀(>﹏<)怎么酶切验证呢？
  • 游客
举报 2017-06-27 07:13
我猜是你挑菌的时候，接种证还没冷就去挑菌了，活活烫死了(〜￣▽￣)〜
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