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哪位前辈可以上传一下C57小鼠骨髓间充质干细胞的具体培养步骤... 已解决
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哪位前辈可以上传一下C57小鼠骨髓间充质干细胞的具体培养步骤
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2017-09-07 07:40
主要有几个问题想问:1,c57小鼠的周龄选多少合适2,冲洗骨髓腔用的是什么?用多少冲?充多少次?我看有人用Pbs,有人用培养基,有人用专门的液冲?不知哪种好3,全骨髓培养法:用离心吗?4,培养基的配方5,长成百分之多少消化6,消化液的配方,消化时间,步骤?7,传到几代就比较纯了希望哪个高手指点一下,谢谢
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2017-08-27 11:35
1.我们用的6-8周的小鼠2.用完全培养基冲就可以3.冲完以后不要离心,拿注射器吹散均匀后就可以
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2017-09-05 10:31
guan9107 谢谢你的指导,请问你们养小鼠骨髓间充质干细胞用的是专门养干细胞的培养基,还是自己配的呢?我这几天看文献,用什么的都有,不知道准备买什么还? 还有就是细胞消化时用加EDTA吗?消化时间多少? 你们的细胞好养吗?我看园子里都说不好养,还没完全开始,就有点信心不足了 |
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2017-09-04 07:50
展开引用 dxy_whlyd493 ...... 没用专门的培养基,就是自己配的α培养基加10%sigma 的FBS加1%双抗。用0.25%的胰酶消化,消化3分钟,原代可能不好消化下来,就用细胞刮轻轻刮下来。可能是因为有个经验很丰富的师兄一直带着的原因,我感觉没什么特别难养的 |
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2017-09-06 23:27
guan9107 非常感谢 |
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2017-09-01 09:34
dxy_whlyd493 还想问您一下,首次换液的时间是多少比较合适呢?还有细胞接种密度多少合适?冻存液,用百分之10的FBS 百分之10的DMSO 百分之八十的DMEM可以吗 |
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2017-08-31 16:01
dxy_whlyd493 我们一般是四天的时候半换液,7天全换。冻存液我们一般是按dmso:血清:培养基1:2:7的比例配。接种密度的话我们是按一只小鼠的两条腿接种一个大的培养瓶 |
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2017-08-28 09:47
guan9107 谢谢你能这么仔细的给我讲解,真的真的特别感谢。 |
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