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肿瘤干细胞培养液可以加双抗么？... 已解决
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肿瘤干细胞培养液可以加双抗么？
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2017-07-05 17:44
展开引用 dxy_h2lc4whq ...... 可以的吧，做原代时，我PBS里都加双抗了 |
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2017-07-09 15:22
可以加，但是尽量还是不要加吧。要看你的细胞来源，还有培养基是不是已经不行了，或是培养环境。 当然，加双抗是最保险的，但是也不能完全避免。是什么污染清楚么 |
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2017-07-04 12:22
七更七子石 我的是结肠肿瘤组织，上两次都是培养基很快就变黄了，应该是细菌污染，这次用了加双抗的培养基，早上去看的时候培养基颜色正常，打算养一段时间后就把双抗去掉。能不加还是不加好。对了，我用胶原酶处理的原代肿瘤细胞，需要直接筛选肿瘤干细胞，即使过滤了也还是有细胞团或组织团，肉眼已经看不见了，显微镜下可观察 ，请问如何去除它们，你有没有什么好的方法，求赐教。 |
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2017-07-06 17:09
医心如泉 谢谢，请问您做的是什么原代？ |
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2017-07-03 02:18
可以加的
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2017-07-11 06:55
dxy_h2lc4whq 小鼠骨髓 脾脏 做免疫细胞 |
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2017-07-11 19:43
展开引用 dxy_h2lc4whq ...... 结肠癌之前我也做过，这个是重度污染的，我都是用高浓度P/S去清洗的，培养的时候必须加双抗。当然，如果不想用抗体的话可以通过流式sorting，也可以用生物净化。流式比较快，而且挺方便的，生物净化周期比较长，成功率还不太高。 |
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2017-07-11 03:54
七更七子石 可是过流式得把细胞消化成单个细胞，可我目前的酶不能完全把组织消化成单个细胞，这样会堵流式得柱子。请问您是怎么克服的呢？还有能不能把您当初做结肠癌的过程发我下，我想看看是哪一步污染了，昨天做的今晚去看又黄了，还有您去医院取组织是怎么取的。我感觉总这个方法污染太大了。组织在外爆率时间太长了。 |
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2017-07-13 14:48
医心如泉 有么有做过人的啊？我的最近老污染，心累 |
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2017-07-12 11:57
dxy_h2lc4whq 可能和你取的结肠癌有关，结肠本身就不是无菌区。我试过做胶质瘤里的TIL，PBS和培养基都加了双抗的。组织没用酶消化，修剪一下直接小块用筛网研磨，然后多晒网多过滤几次，没用酶消化，怕细胞活性不好 |
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