• 游客
收藏 | 举报 2009-07-31 21:10   关注:307   回答:10

【求助】用来做荧光定量PCR的标本能放得时间长吗...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-22 16:09
【求助】用来做荧光定量PCR的标本能放得时间长吗

我来回答
  • 游客
举报 2009-08-03 09:04
手术切除的组织离体15分钟内必须放入液氮内,如果能一直保存在液氮里效果最好,放在低温冰箱也还可以,效果相对稳定,我们两种方法都用过。
  • 游客
举报 2009-08-06 17:39
xuguo520
手术切除的组织离体15分钟内必须放入液氮内,如果能一直保存在液氮里效果最好,放在低温冰箱也还可以,效果相对稳定,我们两种方法都用过。
呵呵 谢谢了 那我就放心啦
  • 游客
举报 2009-08-07 19:38
建议楼主取到标本立即就提取RNA,做到75%酒精洗涤那一步停,将RNA粗沉淀和酒精一起存放-20°,可以保存一年。
待标本收齐,再一起做下一步,这样可能会好些。
  • 游客
举报 2009-08-03 23:23
dingwencheng326
建议楼主取到标本立即就提取RNA,做到75%酒精洗涤那一步停,将RNA粗沉淀和酒精一起存放-20°,可以保存一年。
待标本收齐,再一起做下一步,这样可能会好些。
如果要这样做的话, 我那十几例标本还能用吗 效果是不是就不是很好啦。如果逆转录为cDNA效果是不是会更好哈
  • 游客
举报 2009-08-04 12:36
两种方法都可以,个人认为新鲜样品马上检测最好。
另外,对dingwencheng326的方法不敢苟同,既然提取了RNA,还是反转录后保存更好些吧!
  • 游客
举报 2009-08-02 19:23
逆转录为cDNA后保存的时间并不能很长,而且cDNA本身也会讲解,加上每一种cDNA讲解的速度和程度不一样,时间长了,做后续的基因检测就很难定量了。
RNA粗沉淀放在用DEPC处理水配的75%酒精里能很好的保存RNA。而且,由于取标本的时间不一样,待收齐后再将RNA溶解进行下一步处理,这样能很好的保证起始模板量,做定量分析可能更占优势。
当然,个人意见,网上也有这个说法,实验中我也是这样做的,效果不错。
  • 游客
举报 2009-08-04 14:07
直接做效果好点 液氮冻一下再放冰箱保存也可以得到好的结果我们的冰箱温度是-80
  • 游客
举报 2009-08-01 01:27
直接做效果好点 液氮冻一下再放冰箱保存也可以得到好的结果我们的冰箱温度是-80
  • 游客
举报 2009-08-11 14:16
楼主还在关注吗?我最近要做荧光定量pcr,可是没有超低温冰箱,只能到负20°,这样怎么保存标本啊,能保存几个月,要用Rnalater吗?
  • 游客
举报 2009-08-05 21:58
可以一起收集好再抽提RNA,组织样品长期保存必须在-80,如果匀浆好,加入裂解液后可短期在-20保存。我公司免费设计引物并提供样品抽提RNA的裂解液,各种核酸和蛋白水平的检测技术服务,订购技术服务的客户,我们会妥善保存样品,并提供售后实验指导计算分析,还有包括microRNA,总RNA在内的各种核酸抽提和逆转录试剂盒,各种基因和microRNA的QPCR检测试剂盒,详情可咨询QQ:1327983717 上海诺伦生物医药技术有限公司,老师,欢迎您垂询,谢谢。