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重组蛋白分子量太大,110KD左右,镍柱纯化一直不成功,试了... 待解决
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重组蛋白分子量太大,110KD左右,镍柱纯化一直不成功,试了一系列咪唑梯度,每次都是杂蛋白跟着目的蛋白一起洗脱下来。甚至10mM咪唑都能把目的蛋白洗下来,目前考虑是HiS标签被包埋了。 我用的pet32a载体,有两个his标签。在不重新设计添加his标签的引物的情况下,该怎么获得纯化蛋白呢?
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