• 游客
收藏 | 举报 2018-03-24 16:04   关注:110   回答:1

反转录酶的合成步骤...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-12-04 00:59
反转录酶的合成步骤

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  • 游客
举报 2024-12-04 00:59
1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s
2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL
3、65℃保温5min,然后冰浴5min;
4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份
RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL
10×M-MLVReactionBuffer2μL
DTT(200mM)1μL
逆转录酶(M-MLV)1μL
5、轻轻混匀后,然后2000rpm离心20s;
6、先在37℃保温1hr,然后70℃保温15min;
7、上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。向左转|向右转