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做wb的bax和bcl-2的目的蛋白时会出现时间长的细胞凋亡... 已解决
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- 解决时间 2024-12-22 00:34
做wb的bax和bcl-2的目的蛋白时会出现时间长的细胞凋亡而导致内参出不来吗
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2018-02-21 02:46
α-平滑肌肌动蛋白是23kD。
1、如果是提取的总蛋白，然后做WB，用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的，这是公认的东西。 2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白，再用β-actin作为内参似乎不妥，因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而，如果我们试验目的是用药物处理细胞，比较处理前后某种膜蛋白的表达情况，此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了，因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话，β-actin就是检测不到的。 |
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